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猪流感(Swine influenza,SI)是由猪流感病毒(Swine influenza virus,SIV)引起的猪的重要的呼吸道疾病,该病常常与其他疾病混合感染给养猪业造成严重的损害。猪流感已遍布世界各地,是规模化猪场普遍存在且难以根除的群发生性疾病。为了了解广西猪群猪流感的流行情况,我们在2005-2009年期间对广西全区100多个猪场和14个市的农村牲猪散养户进行了调查,分离获得3株病毒,并进行了系统鉴定。
⑴猪流感的流行病学调查:本研究采取问卷调查,现场调查与观察、红血球凝集抑制(HI)试验和ELISA试验及病原学检测等方法,对广西14市16个重点种猪场和28个规模猪场采集的2673份血清和农村牲猪散养户的2240份血清共4913份血清,进行了H1和H3亚型猪流感HI抗体及H1N1亚型ELISA抗体检测,同时采用RT-PCR方法对2005-2009年广西全区142个猪场采集的297份组织病料(肺、脾、淋巴结等)、以及9个市37个猪场887份猪(不同年龄段)鼻腔棉拭子进行了病原学检测。结果为:(1)血清学调查:所有的规模猪场和农村牲猪散养户的猪群都存在SIV抗体,规模猪场H1亚型猪流感抗体阳性率在0-95.27%之间,平均阳性率为47.47%;H3亚型猪流感抗体阳性率在0-82.81%之间,平均阳性率为41.49%;同时感染H1和H3亚型的抗体阳性率在0-70.31%之间,平均阳性率为23.38%。不同地区农村牲猪散养户H1亚型猪流感抗体阳性率在8.16-35.63%之间,平均阳性率为22.54%;H3亚型猪流感抗体阳性率在5.63%-31.88%之间,平均阳性率为16.70%;同时感染H1和H3亚型的抗体阳性率在0-17.50%之间,平均阳性率为6.61%。规模猪场H1N1亚型猪流感ELISA抗体阳性率在0-100%之间,平均阳性率为43.71%,农村牲猪散养户H1N1亚型猪流感ELISA抗体阳性率在4.38-52.17%之间,平均阳性率为25.78%。(2)病原学检测:14个市的猪组织病料中均检出SIV,SIV组织病料的平均阳性率为19.87%(59/297),感染SIV的猪场阳性率为22.54%(32/142)。猪鼻腔棉拭子SIV带毒阳性率为13.42%(119/887),感染SIV的猪场阳性率为18.92%(7/37)。
⑵猪流感病毒的分离与鉴定:本研究运用9-11日龄鸡胚尿囊腔接种试验对疑似猪流感病毒感染的组织样品进行病毒分离,并将分离到的病毒尿囊液接种小鼠、大鼠、豚鼠和家兔等实验动物和2个月大小的仔猪进行动物攻毒试验,结果为:鸡胚尿囊腔接种分离到3株流感病毒,经鉴定为H1N2亚型病毒。分离毒株均能凝集小鼠、大鼠、豚鼠、家兔和猪的红细胞;小鼠、大鼠和家兔对分离毒株不敏感,而豚鼠比较敏感并能较好地复制出流感症状和病理变化。本体动物试验显示,分离毒株没有明显的致病性,仔猪只有轻微的体温升高,并能检测到仔猪抗体水平升降变化,还能从攻毒后14天以内的鼻腔粘液中检测到流感病毒。综合以上结果,猪流感已在广西猪群中普遍存在,混合感染和健康带毒现象也相当普遍,猪流感已对广西养猪业带来较大威胁,从而丰富了本病流行病学资料。