bFGF-胶原海绵用于大鼠直接盖髓的实验观察

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目的用bFGF-胶原蛋白复合海绵作为直接盖髓剂,观察大鼠直接盖髓术后牙髓组织的生物学反应及第三期牙本质形成情况,探讨bFGF-胶原海绵作为直接盖髓材料的可行性及疗效。方法制作bFGF-胶原蛋白复合海绵,扫描电镜观察并检测其pH值。选取雄性SD大鼠18只,随机分为Ca(OH)2组和bFGF-胶原组,每组9只。在每只大鼠上颌第一磨牙咬合面开髓,分别用Ca(OH)2和bFGF-胶原海绵直接盖髓,玻璃离子充填。在手术后第2、4、8周处死,获取标本,进行大体观察、HE染色和ALP、TGF-β1及COL-I免疫组化染色。采用SPSS13.0统计软件包对术后8周两组新生的第三期牙本质面积进行分析,用Levene’s test检验方差是否齐性,两组之间采用小样本t检验,P<0.05则认为差异有统计学意义。结果1、大体观察结果:术后2周、4周两组开髓处均未观察到新生硬组织形成;术后8周牙咬合面可见不同程度的磨耗,个别牙开髓处可见乳白色组织形成。2、HE染色结果:术后2周,两组盖髓剂下方均有不同程度的炎症反应,其中bFGF-胶原组炎症反应较Ca(OH)2组轻,有1例观察到功能期成牙本质细胞;术后4周,Ca(OH)2组中有2例见不完整牙本质桥形成,bFGF-胶原组有4例观察到不完整的牙本质桥;术后8周,均未见明显炎症反应,两组均可见面积大小不等的新生牙本质,且面积均较4周时增大,bFGF-胶原组有1例观察到完整牙本质桥形成。3、免疫组化结果:选取术后2周的切片进行免疫组化染色,结果显示:1) Ca(OH)2组ALP阳性表达主要位于正常牙髓最表层,棕染程度不均一;bFGF-胶原组ALP染色位于正常牙髓最表层,呈强阳性表达。2) Ca(OH)2组TGF-β1阳性表达位于正常牙髓最表层,部分区域强阳性表达;bFGF-胶原组于盖髓处下方牙髓最表层,呈强阳性表达。3) Ca(OH)2组COL-I牙髓结缔组织呈阳性表达,部分区域呈强阳性表达;bFGF-胶原组牙髓结缔组织均可见COL-I阳性表达,棕染程度较均一。4、用图像分析软件测定术后8周两组新生牙本质面积,采用SPSS13.0统计软件进行分析,bFGF-胶原组新生牙本质面积均数(1.82981mm2)大于Ca(OH)2组(1.33591mm2),两组差异无统计学意义(P>0.05)。结论1、bFGF-胶原蛋白复合海绵用于直接盖髓治疗时对牙髓组织没有明显的刺激性,不引起牙髓明显的炎症反应。2、bFGF-胶原蛋白复合海绵能够促进牙髓-牙本质复合体的修复过程,修复性牙本质形成较Ca(OH)2为早且形成速度快。3、bFGF-胶原蛋白复合海绵作为一种理想的盖髓材料,可用于直接盖髓。bFGF-胶原蛋白复合海绵理化性能、机械性及生物学性能良好,能够促进牙髓-牙本质复合体的修复性反应和第三期牙本质的形成,有望成为一种理想的复合型生物盖髓材料。
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