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近年来,我国食品安全问题频发,“瘦肉精”中毒事件,“速生鸡”事件,三聚氰胺奶粉事件,苏丹红蛋黄事件,喹乙醇超标事件,磺胺二甲嘧啶超标事件,碱性橙染色大黄鱼、豆腐皮事件相继出现。这些食品问题给人们的身体健康带来了巨大的危害。比如,三聚氰胺的长期积累会引起肾结石,最终导致肾衰竭。瘦肉精的长期积累会导致心脑血管疾病和神经系统疾病。碱性橙会导致慢性中毒,最终致癌。磺胺二甲嘧啶超标会导致变态反应与过敏反应,致癌、致畸、致突变作用。这些食品安全问题凸显出农、兽药滥用和食品添加剂违法添加现状,及食品市场监管缺失等问题,所以急需寻找一种有效的检测方法监督食品安全。目前,这些食品添加剂的检测方法有很多。例如高效液相色谱法,气相色谱法,气-质联用法,酶免疫法,分子印迹法,荧光光谱法等。但其中大多数的方法都需要昂贵的仪器,操作复杂,成本高,不适合日常检测,所以寻找一种成本低,操作简单、灵敏度高、选择性好的检测方法就显得十分必要。根据文献,氨基多羧酸化合物是一种经典的螯合剂,本身具有较强的配位能力,几乎可以与所有金属离子形成稳定的配合物,与某些稀土金属离子形成的配合物还具有较长的荧光寿命,可以发出稳定地特征荧光。另外,在DNA/RNA单链上碱基是按照一定次序排列的,如-GTAACGG-。根据碱基互补配对原则,单链上的碱基与互补碱基配对,如A(腺嘌呤)与T(胸腺嘧啶)配对,G(鸟嘌呤)与C(胞嘧啶)配对,A(腺嘌呤)与U(尿嘧啶)配对等,按照一定序列形成DNA/RNA双螺旋结构,利用DNA序列的特殊识别作用制成的生物传感器在很多领域均有着广泛的应用。鉴于以上两点,我们以氨基多羧酸化合物作为配体,根据食品添加剂的化学性质和结构组成,同时参照DNA/RNA单链碱基排序规则,选择能识别分析物的碱基或碱基类似物修饰配体,与金属铕离子反应,合成新型的稀土氨基多羧酸铕配合物,作为荧光探针,检测某些食品添加剂。本研究中,我们合成了四种铕配合物荧光探针,分别为EuIII-dtpa-bis(melamine),Eu III-dtpa-bis(3,5-dichloroaniline)(EuIII-dtpa-bis(DCA)),EuIII-dtpa-bis(cytosine)和EuIII-dtpa-bis(adenine)。通过红外光谱分析,紫外光谱分析和荧光光谱分析,分别研究了这四种铕配合物荧光探针检测某些食品添加剂,如三聚氰胺(Mel)、克仑特罗(Clb)、碱性橙(BO)和磺胺二甲嘧啶(SMZ)的可行性,推测其结合比例和作用机理。研究表明:1)配合物EuIII-dtpa-bis(melamine)作为荧光探针在检测三聚氰胺(Mel)中具有非常好的荧光特异性,类似物三聚氰酸(Cya)、三聚氰氯(Cyach)、三聚异氰酸(Isocya)和甲基胍胺(Methyla)的存在并不影响三聚氰胺的检测。在浓度范围5-100μmol/L内,三聚氰胺(Mel)的浓度与其对应的荧光强度呈线性关系,线性方程为y=38.68x+568.32(R2=0.9972),检出限(LOD)为0.3743μmol/L(LOD=3σ/s)。当C[Mel]=CIII[Eu-dtpa-bis(melamine)]=100μmol/L时,配合物EuШ-dtpa-bis(melamine)的荧光强度接近最大值并保持不变,推测配合物EuIII-dtpa-bis(melamine)与三聚氰胺的比例为1:1。在实际样品分析中,对牛奶、酸奶和奶粉中三聚氰胺的回收率在99.8%-100.5%之间。2)配合物EuIII-dtpa-bis(DCA)作为荧光探针在检测克仑特罗中具有非常好的荧光特异性,共存物脲(U),葡萄糖(G),马尿酸(Ha),L-苯丙氨酸(Pha)和尿酸(Ua)的存在并不影响克仑特罗的检测。在浓度范围5-300μmol/L内,荧光强度比F0/F(F0为配合物EuIII-dtpa-bis(DCA)的荧光强度,F为克仑特罗存在下配合物的荧光强度)与克仑特罗(Clb)浓度(C[Clb])呈现良好的线性关系,线性方程为y=0.0558x+1.0157(R2=0.9984),检出限(LOD)为0.3369μmol/L(LOD=3σ/s)。当C[Clb]=3C[EuШ-dtpa-bis(DCA)]=300μmol/L时,配合物EuШ-dtpa-bis(DCA)的荧光强度降到最小值并保持不变,推测配合物EuIII-dtpa-bis(DCA)与克仑特罗的比例是1:3。在实际样品分析中,对幼儿尿液中克仑特罗的回收率在90.8%-96.2%之间。3)配合物EuШ-dtpa-bis(cytosine)作为荧光探针在检测碱性橙中具有非常好的荧光特异性,共存物葡萄糖(G)、L-苯丙氨酸(Pha)、组氨酸(His)、抗坏血酸(Aa)和肌酐(Cre)并不影响碱性橙的检测。在浓度范围5-100μmol/L内,碱性橙浓度与其对应的荧光强度呈线性关系,线性方程为y=-32.3406x+561.9674(R2=0.9946),检出限(LOD=3σ/s)为0.1291μmol/L。当C[BO]=3C[EuШ-dtpa-bis(cytosine)]=300μmol/L时,荧光强度接近最小值并保持不变,推测配合物EuШ-dtpa-bis(cytosine)与碱性橙的比例是1:3。在实际样品分析中,对豆腐皮中碱性橙的回收率80.8%-87.3%之间。4)配合物EuШ-dtpa-bis(adenine)作为荧光探针在检测磺胺二甲嘧啶中具有非常好的荧光特异性,共存物葡萄糖(G)、L-苯丙氨酸(Pha)、组氨酸(His)、抗坏血酸(Aa)和甘氨酸(Gly)的存在并不影响磺胺二甲嘧啶的检测。在浓度范围5-100μmol/L内,荧光强度比F0/F(其中F0为探针EuIII-dtpa-bis(adenine)的荧光强度,F为磺胺二甲嘧啶存在时EuIII-dtpa-bis(adenine)的荧光强度)和磺胺二甲嘧啶的浓度(C[SMZ])呈现良好的线性关系,线性方程为y=0.2938x+0.8562(R2=0.9923),检出限(LOD)为0.4527×10-77 mol/L(LOD=3σ/s)。当C[SMZ]=C[EuIII-dtpa-bis(adenine)]=1.00×10-44 mol/L时,荧光强度接近最小值并保持不变,推测配合物EuIII-dtpa-bis(adenine)与磺胺二甲嘧啶的比例为1:1。在实际样品分析中,对蜂蜜中磺胺二甲嘧啶的回收率在87.2%-92.5%之间。