缢蛏多糖提取纯化及其活性研究

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缢蛏(Sinonovacula constricta ;Lamarck)是竹蛏科贝类动物,是我国传统四大养殖贝类之一,具有丰富的营养价值以及特殊的药膳保健功效。本研究选用缢蛏为材料提取缢蛏多糖,并对其进行分离纯化、体外抗氧化活性以及缢蛏多糖理化性质和结构的研究,为缢蛏多糖药用价值研究奠定理论基础。本研究包括:1缢蛏多糖提取工艺的优化目的:研究缢蛏多糖的最佳提取工艺。方法:在单因素实验的基础上,通过正交实验研究了料液比、浸提时间、浸提温度、提取次数对缢蛏总糖提取率的影响。结果:缢蛏多糖提取的最佳工艺为:温度为90℃,时间为3 h,料液比为1:80。2缢蛏多糖的分离纯化目的:对缢蛏粗多糖进行分离纯化。方法:缢蛏粗多糖经过除蛋白质和小分子杂质、DEAE—52离子交换层析和SephadexG—100凝胶过滤层析分离纯化。DEAE—52分别用蒸馏水、0.5MNaCI,洗脱分得两种主要级分,即水洗级分(LPS—I)、盐洗级分(不研究)。用紫外光谱分析法(UV)和高效液相色谱(HPLC)法分析多糖纯度。结果:缢蛏多糖LPS—I为均一多糖。3缢蛏多糖体外抗氧化活性研究目的:研究缢蛏多糖的体外抗氧化活性。方法:通过缢蛏多糖对Fenton体系产生的·OH、邻苯三酚自氧化法产生的·02一的清除、体外抗肝组织自发性脂质过氧化以及H2O2诱导红细胞氧化溶血作用,研究缢蛏多糖的体外抗氧化活性。结果:缢蛏多糖对羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(·02一)具有较强的清除作用,清除能力随多糖浓度的增大而增大;缢蛏多糖可抑制脂质过氧化物的生成,此抑制作用具有一定的量效关系,在缢蛏多糖浓度为6 mg/mL时,LPO清除率可达到63.72%;此外还发现缢蛏多糖具有较好的抑制氧化损伤,保护红细胞膜的功能。4缢蛏多糖LPS-I结构和理化性质的研究目的:研究缢蛏多糖LPS-I的结构和理化性质。方法:通过薄层层析法、红外光谱仪、高效液相色谱仪和气相色谱仪对LPS-I进行分析。结果:缢蛏多糖LPS-I具有多糖的特征吸收峰,是由葡萄糖单一组成、主链以α-吡喃糖苷键连接为主的多糖。
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