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雌性动物的繁殖性能和肠道功能与其年龄的增加呈负相关。在肉鸡产蛋后期,器官功能、卵黄前体物质合成水平、卵泡发育、生育能力、产蛋率、孵化率、肠道完整性、免疫屏障功能以及肠道微生物群组成和代谢物特征下降。而饲料营养水平与种鸡繁殖性能呈正相关,通过制定适宜的营养策略以改善肉鸡产蛋后期的繁殖和生理性能的分子机制是家禽饲养环节非常关注的问题。槲皮素是一种类黄酮。槲皮素是一种具有生物活性的植物类激素,可以改善免疫力,具有抗氧化剂和抗炎的功效。在动物体内,维生素E也具有抗氧化的作用,同时可以对种蛋、胚胎发育、繁殖性能和免疫调节具有积极作用。越来越多的证据表明,槲皮素、维生素E可以改善种鸡的繁殖性能、抗氧化和生理功能,但是对产蛋后期的种鸡,这两种添加剂调节繁殖性能、免疫力、种蛋品质、肠道健康的抗氧化功能分子机制尚未确定。本研究的目的是揭示槲皮素（Q）、维生素E（VE）及其组合使用对调节氧化应激清除的分子机制,阐明促进卵黄前体物质合成和激素调节相关的转录和生化因素,以及探明对产蛋后期种鸡的卵泡发育、产蛋量、蛋品质、孵化率、肠道完整性、免疫屏障功能以及盲肠微生物群和代谢物特征的调节作用。本试验以400只天府肉鸡种鸡（52周,产蛋率＞50%）为研究对象,随机分配为4组,每组设置4个重复。将种鸡分为基础饮食组（control组）;基础饮食+0.4g/kg槲皮素（Q组）;基础饮食+0.2g/kg维生素E（VE组）;基础饮食+0.4g/kg槲皮素和0.2 g/kg维生素E（Q+VE组）,进行饲喂10周。在试验期结束时,每个处理组采取2只（共32只）种鸡血液、肝脏、卵巢、脾脏、十二指肠、空肠、回肠和盲肠内容物样本,进行生化指标、组织学及q PCR检测,以及16Sr RNA测序和盲肠内容物的非靶向代谢组学分析。主要结果如下:1.处理组较对照组均显著改善了产蛋性能和蛋品质（P＜0.05）,提高了血清免疫球蛋白（Ig A、Ig M和Ig G）和细胞因子（IFN-γ和IL-2）的浓度,促进了免疫器官发育和脾脏免疫相关基因表达（IL-2和INF-γ）（P＜0.05）。2.Q+VE组改善了器官特性（P＜0.05）,Q+VE组对肝脏的损伤具有保护作用,并增加了肝脏,血清和卵巢的抗氧化能力（P＜0.05）。此外,该处理组种鸡的甘油三酯水平的变化表明肝脏脂质合成显著增加（P＜0.05）,提高了E2,FSH和LH及其受体的含量水平,并提高了卵黄前体物质合成相关的m RNA的表达水平（P＜0.05）。3.Q+VE组通过提高绒毛高度和隐窝深度（P＜0.05）对肠道形态产生协同作用,减轻了老年母鸡的肠道炎症损伤,同时降低了血清D-乳酸和二胺氧化酶的浓度;并提高了分泌性免疫球蛋白A（s Ig A）和Mucin-2 m RNA（P＜0.05）水平。此外,occludin,ZO1和claudin-1在肠道紧密连接蛋白的m RNA表达量增加（P＜0.05）。此外,该处理组降低了促炎症基因（TNF-α,IL-6和IL-1β）的m RNA表达,增加抗炎基因表达（IL-10和IL-4）（P＜0.05）,这些结果与Bax和Bcl-2的m RNA表达一致。此外,Q+VE组通过增加超氧化物歧化酶、总抗氧化能力、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶（P＜0.05）的水平以及SOD1和GPx-2的m RNA表达量,使小肠免受到氧化损伤。Q+VE组与对照组相比,降低了肠道中的丙二醛水平（P＜0.05）。4.16S rRNA基因测序和盲肠内容物非靶向代谢组分析表明,在所有饮食组中,拟杆菌门、厚壁菌门和放线菌门的相对丰度最为突出。与对照组相比,双歧杆菌科、拉氏杆菌科、苜蓿科、马蹄莲科、巴内氏菌科、茴香科和苜蓿科的相对丰度在Q+VE组丰富;拟杆菌科、脱硫菌科、荚蒾科、腐生菌科和腐生杆菌科富集于Q组,而乳酸菌科、苜蓿科、红孢子菌科、赤霉菌科、赤藓科富集于VE组。非靶向代谢组学分析显示,Q组,VE组和Q+VE组改变了重要通路中几种代谢物的丰度,包括乌比醌和其他醌类生物合成,肌动蛋白细胞骨架的调节,胰岛素分泌,胰腺分泌,尼古丁成瘾和外源性细胞色素P450代谢。此外,与重要代谢物显著相关的主要盲肠菌群,例如在VE与对照组中,（S）-equol与Alistipes,Chlamydia呈正相关,与Olsenella,Paraprevotella和Mucispirillum呈负相关,但在Q+VE组与对照组中观察到Parabacteroides呈现相反趋势。5.此外,Q+VE组母鸡蛋黄的重量、蛋黄的抗氧化水平增加（P＜0.05）。与对照组相比,Q+VE组显著提高了受精蛋孵化率,分别降低了种蛋孵化第7天和14天的胚胎死亡率（P＜0.05）,也提高了储存14天后种蛋孵化时,胚胎的抗氧化能力（P＜0.05）。此外,Q+VE组增加了胚胎期、1日龄和14日龄雏鸡的肝脏、心脏和胸肌中SOD、GSH-Px、T-AOC、T-SOD和CAT的水平（P＜0.05）,并上调了抗氧化相关基因（GPx-1,GPx-2,GPx-4,DIO-1和SOD-1）)在胚胎的肝脏中的表达（P＜0.05）。同时,Q+VE组降低了胚胎和孵化后雏鸡的MDA水平（P＜0.05）。综上所述,槲皮素与维生素E的结合对蛋鸡产蛋、蛋品质和免疫功能具有协同作用,促进和调节了合成物在肝-血液-卵巢之间的运输和交换,以确保种鸡肝脏与卵巢的同步发育和功能协调。此外,槲皮素和维生素E的协同作用通过保护肠道结构和完整性,改善了产蛋后期种鸡的肠道功能,Q+VE组可以作为抗衰老剂,提升鸡小肠的生理功能。此外,该试验结果为槲皮素结合维生素E改变肠道微生物群和代谢物谱从而促进产蛋后期种鸡繁殖性能的机制提供了理论依据,提供了有关生物标志物及验证的信息,促进了蛋鸡繁殖和遗传改良。最后,本研究表明,母体日粮添加槲皮素与维生素E后,对延长种蛋储存期后的蛋黄、胚胎、雏鸡抗氧化能力具有的促进作用,因此,槲皮素与维生素E结合使用可作为提高家禽繁殖能力、种蛋孵化率和雏鸡健康水平的饮食措施。