【摘 要】
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根据原核生物基因无内含子的特点,该实验参照大肠杆菌与耐盐性相关的甘露醇-1-磷酸脱氢酶(mtlD)基因的保守序列设计一对引物,以极端嗜盐细菌假单胞杆菌(Pseudomonas sp.cn 49
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根据原核生物基因无内含子的特点,该实验参照大肠杆菌与耐盐性相关的甘露醇-1-磷酸脱氢酶(mtlD)基因的保守序列设计一对引物,以极端嗜盐细菌假单胞杆菌(Pseudomonas sp.cn 4902)的总DNA为模板,通过PCR扩增出mtlD结构基因,将该基因克隆至pMD18-T载体,测序结果表明:假单胞杆菌的mtlD结构基因长1149bp,编码383个氨基酸.该序列与多种生物的mtlD基因高度同源,与E.coliK12的mtlD基因的同源性高达99﹪.将该结构基因与pBV220质粒构建成大肠杆菌高效表达重组载体pBH.此外,为了将该基因转入农作物中表达,该文尚构建了植物双元表达重组质粒pCH1301,并已成功转化农杆菌(Agrobacteriumrhizogenes EHA105).
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