龙眼(Dimdcarpus longana Lour.)是亚热带具有重要经济价值的果树,属无患子科(Saindaceae)龙眼属。龙眼生产中,果粒大小是影响品质的一个重要因素。尽管目前在植物胚胎发育方面的研究已经比较深入,但仍未能从根本上阐明植物胚胎的发生、发育规律。本研究采用双向电泳技术分离‘青壳宝元’龙眼子叶胚蛋白,通过比较不同发育时期的蛋白质表达差异情况,以及差异蛋白的生物学功能分析,揭示了龙眼胚胎发育的分子本质。试验中对蛋白质样品的制备、双向电泳参数、染色等技术进行了优化,建立了适合龙眼胚胎蛋白质组学的研究平台。采用pH4-7的胶条和凝胶浓度为12.5%的SDS-PAGE,在经过考染的双向电泳图谱上共检测到1000多个胚胎可溶性蛋白。利用PDQuest软件分析比较蛋白质图谱,得到46个在子叶胚发育不同时期表达量明显发生变化的蛋白,选取36个蛋白丰度表达变化在2倍以上的差异蛋白点进行MALDI-TOF-TOF/MS分析,经数据库检索,鉴定出26个蛋白,其中13个蛋白上调表达,11个蛋白下调表达,另有2个蛋白呈现波动变化。这些蛋白的功能涉及能量代谢(23%)、次生代谢(15%)、蛋白质代谢(27%)、抗氧化作用(4%)、核酸代谢(4%)、未分类蛋白(8%)、未知蛋白(19%),其中一些蛋白是首次被发现与胚胎发育相关。此外,进一步用Western杂交对抗坏血酸过氧化物酶在龙眼子叶胚发育过程中的表达变化进行验证。通过对龙眼子叶胚发育过程中差异表达蛋白的功能分析,我们获得了龙眼子叶胚发育过程中重要的蛋白质水平信息,为进一步研究龙眼胚胎发育的分子机制提供了基础。