随着分子生物学的快速发展和基因工程的深入研究,植物转基因技术在生物学中的地位越来越重要,利用转基因植物生产具有重要功效的外源重组蛋白也已成为人们研究的热点。首先利用植物系统可以大规模的生产外源蛋白,成本低廉；其次植物生产的外源蛋白不含致病微生物和动物病毒,相对比较安全；最后贮藏在植物果实、种子中的外源蛋白方便储藏、利于运输；以上这些优点为植物生产药用蛋白提供了广阔的应用前景。碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是人体内一种特殊的活性物质,它能够促进神经纤维细胞、表皮细胞和软骨细胞的生长,在临床上具有重要意义和广泛的应用价值。为了降低生产成本及满足市场对bFGF的大量需求,本实验对利用转基因拟南芥和转基因红花生产重组蛋白bFGF进行了探索,得到一下结论：1.以菜豆为材料,利用植物油体系统表达bFGF。以菜豆总DNA为模板,PCR扩增得到菜豆油体蛋白启动子序列。同时,利用融合PCR技术扩增得到oleosin-bFGF的融合基因。再此基础上,构建植物表达载体p1301-P-oleosin-bFGF。将重组质粒转入农杆菌EHA105,利用Flori-Dip法转化拟南芥。经basta筛选之后,获得4株转基因拟南芥株系。最后,在分子和蛋白水平对转基因拟南芥进行检测,结果如下：1) SDS-PAGE和Western结果证明融合蛋白在拟南芥种子中有表达。2) NIH3T3细胞的促生长实验证明利用拟南芥种子生产的bFGF具有生物活性。2.以新疆无刺红花为植物材料进行研究,初步建立了红花的再生培养体系。利用农杆菌介导,将植物表达载体的T-DNA区整合到红花的基因组中,利用含basta的培养基筛选得到转基因植株。在分子水平对转基因红花进行检测：PCR扩增结果显示融合基因成功整合到红花基因组中。本研究成功地利用转基因拟南芥和红花表达了碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),并证明利用转基因拟南芥生产的重组蛋白具有生物活性,但其药理药效实验和临床前研究还有待进一步展开。本实验为利用植物油体系统生产药用蛋白奠定了基础,也为利用红花生产其他具有重要功能的外源蛋白提供了依据。