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目的:探讨精氨酸特异性腺苷二磷酸核糖基化转移酶1(Arginine-specific ADP ribosyltransferase-1,ART1)基因表达对小鼠结肠癌CT26细胞生长增殖的影响和相关机制。方法:细胞免疫荧光法检测ART1水平,以证实CT26细胞中有ART1的表达。以ART1-shRNA、 NC-shRNA(Negativecontrol-shRNA,NC-shRNA)、ART1过表达三种慢病毒颗粒感染CT26细胞,以NC-shRNA组和未转染组作为对照组。采用RT-PCR和Western blot检测四组细胞ART1mRNA和ART1蛋白的表达。细胞免疫荧光法观察四组细胞中ART1表达的差异;CCK-8(cell countingkit-8)法分析各组细胞增殖情况,流式细胞术观察各组细胞周期分布。构建小鼠结肠癌移植瘤模型,观察各组移植瘤的生长状况(体积、重量)和小鼠存活时间,Western blot检测移植瘤组织中ART1蛋白表达水平的变化。Western blot检测各组细胞及移植瘤组织中RhoA和下游因子c-myc、c-fos及COX-2蛋白的表达。结果:1.CT26细胞中有ART1的表达。2.三种慢病毒成功感染细胞,获得稳定的相应CT26细胞株。3.RT-PCR和western blot结果显示,与对照组相比,在ART1-shRNA组CT26细胞中,ART1mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05),而在ART1过表达组CT26细胞中显著增高(P<0.05),NC-shRNA组和未感染组间无明显差异(P>0.05)。4.细胞免疫荧光结果显示,ART1在ART1-shRNA组的CT26细胞中几乎无表达,其平均荧光强度值(17.35±2.01)显著小于对照组(P<0.05),在ART1过表达组中有强烈的表达且高于对照组(61.41±3.51)(P<0.05)。5. CCK8法结果显示, ART1-shRNA组中CT26细胞的增殖抑制率明显高于对照组(P<0.05), ART1过表达组CT26细胞增殖抑制率显著低于未感染组(P<0.05)。6.流式细胞术检测发现,与对照相比较,ART1-shRNA组CT26细胞分裂各个时期细胞百分率产生了显著的变化,G2期和S期明显降低、细胞增殖指数明显降低(P<0.05);ART1过表达组CT26细胞则相反,G2期和S期显著增高、细胞增殖指数显著增高(P<0.05)。7.在动物皮下移植瘤模型中,各组移植瘤的生长状况显示,与对照组移植瘤的体积和重量数据相比较,ART1-shRNA组明显减小(P<0.05), ART1过表达组明显增大(P<0.05);荷瘤小鼠存活状况结果表明,ART1-shRNA组小鼠平均存活时间较对照组明显延长(P<0.05),ART1过表达组明显缩短(P<0.05)。8.移植瘤组织进行western blot检测后发现,与对照组中ART1蛋白的表达比较,ART1-shRNA组中的表达明显降低(P<0.05),ART1过表达组明显升高(P<0.05)。各组细胞和移植瘤组织中RhoA、c-myc、c-fos和COX-2蛋白的western blot检测结果显示,ART1-shRNA组各因子的表达明显降低(P<0.05),ART1过表达组明显升高(P<0.05)。结论:干扰和促进ART1表达分别可以抑制和促进CT26细胞增殖,提示ART1在肿瘤生长增殖过程中发挥重要作用。其机制可能与改变ART1基因表达可以影响RhoA及其下游因子c-myc、c-fos、COX-2的表达有关。