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目的:大量天然多糖被报道可以通过各种不同的机制发挥抗2型糖尿病作用，胰岛素抵抗是2型糖尿病发生发展的重要病理基础，胰岛素抵抗的HepG2人肝癌细胞模型是国内外研究胰岛素抵抗最常用的细胞模型之一，本研究前期通过对中医期刊文献，古代名方，经方，以及古代医学书籍的查阅，筛选出候选中药三十味，利用高胰岛素诱导的胰岛素抵抗HepG2细胞模型，以促进细胞葡萄糖摄取量为指标，对三十味候选中药的多糖成分进行体外筛选并活性追踪，并对体外筛选得到的活性最佳的薜荔果均一多糖FPLP的一级化学结构，以及在db/db糖尿病模型小鼠和高脂饮食诱导肥胖小鼠中的改善胰岛素抵抗的活性及其潜在机制进行了研究。 方法:1、体外活性筛选方法:基于文献方法对HepG2细胞的胰岛素抵抗模型进行复制并确认，以葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法(GOP-POD法)和放射性2-脱氧-D-[3H]葡萄糖示踪法检测细胞的葡萄糖摄取量，以噻唑蓝(MTT)法检测候选多糖的细胞毒性，通过测定各个候选多糖对模型细胞的葡萄糖摄取量的作用，综合考虑候选多糖的细胞毒性作用，评价、追踪并筛选出活性多糖。 2、提取分离纯化方法:依次利用水提醇沉法，弱阴离子交换色谱法和分子筛凝胶色谱法对多糖进行提取分离纯化;通过苯酚-硫酸法测定总多糖含量，BCA法测定总蛋白含量，间羟基联苯法测定糖醛酸含量;采用高效液相凝胶色谱(HPGPC)对均一性进行鉴定。 3、化学结构解析方法:采用HPGPC结合标准葡聚糖曲线对分子量进行测定;采用傅里叶变换红外光谱(FTIR)分析对其纯度和是否含酸性基团进行测定;采用完全酸水解结合气相色谱(GC)对单糖组成进行测定;采用甲基化反应结合气质联用(GC-MS)对链接方式进行分析;采用1H NMR、13C NMR、DEPT135NMR以及2D NMR分析，对一级化学结构进行最后确定。 4、改善胰岛素抵抗作用研究:采用2型糖尿病模型db/db小鼠和高脂饲料诱导肥胖C56BL/6小鼠对FPLP进行药效学研究，利用商业试剂盒，测定各相关指标;利用HE染色分析，观察形态学变化;利用免疫荧光染色，观察目标蛋白表达数量的变化;利用PAS染色结合商业试剂盒检测糖原含量变化;通过real-time PCR和Western blotting法对相关的基因和蛋白表达水平进行测定;利用肠道微生物16s rRNA基因V3-V4区高通量测序，分析肠道微生物结构的变化。 结果:1、本研究采用以500nM浓度的胰岛素诱导HepG2细胞48h，模型组细胞的葡萄糖消耗量显著性低于正常组细胞，说明模型组细胞产生胰岛素抵抗，模型复制成功。在胰岛素抵抗细胞模型上，通过层层筛选，筛选得到薜荔果多糖FPLP可以增加胰岛素抵抗HepG2细胞的2-脱氧-D-[3H]葡萄糖的摄取量。 2、通过水提醇沉，DEAE-Sepharose Fast Flow弱阴离子交换色谱和SuperdexTMG-75分子筛凝胶色谱法，从薜荔果中提取，分离及纯化得到均一多糖FPLP（得率0.79％），其总糖含量为39.1％，糖醛酸含量为97.79％，几乎不含蛋白。 3、通过化学和仪器分析的方法，解析得出FPLP(3.47×104Da)为连接有1.30％己烯糖醛酸的1，4-α-D-半乳糖醛酸，其甲酯化度为23.34％，为HG型果胶类多糖。 4、药效学试验表明FPLP(100，200mg/kg)可以显著性降低db/db小鼠的空腹葡萄糖水平，改善其口服葡萄糖耐量和腹腔胰岛素耐量，并且可以一定程度的改善db/db小鼠高胰岛素，高胰高血糖素血症，增加胰岛素敏感性，同时对脂代谢紊乱有缓解作用。FPLP通过降低db/db小鼠肝脏G6Pase和PEPCK的mRNA和蛋白表达，并增加GK的mRNA和蛋白表达，改善肝糖代谢;同时，FPLP可通过激活肝脏中IRS-1/PI3K-p85/AKT/GS/GSK-3β胰岛素信号通路并增加肝脏中AMPK苏氨酸172位点的磷酸化水平，增加肝细胞的胰岛素信号敏感性，从而抑制糖原合成酶(GS)的磷酸化作用，增加肝细胞糖原合成，增加肝细胞对葡萄糖的利用。FPLP(200mg/kg)可以缓解高脂饮食诱导的体重增加，降低胰岛素抵抗和机体炎症水平，改善高血脂症状，并且可以缓解高脂饮食导致的肠粘膜屏障的破坏和降低肠道微生物中厚壁菌/拟杆菌比例以及增加Akkermansia muciniphila的丰度。 结论:在胰岛素抵抗HepG2细胞模型上，通过层层筛选，筛选得到了一种薜荔果活性多糖FPLP，可以增加胰岛素抵抗HepG2细胞的2-脱氧-D-[3H]葡萄糖的摄取量。化学结构鉴定得出FPLP(3.47×104Da)为连接有1.30％己烯糖醛酸的1，4-α-D-半乳糖醛酸，其甲酯化度为23.34％，为HG型果胶类多糖。FPLP可以降低2型糖尿病模型db/db小鼠的空腹血糖水平并改善其胰岛素抵抗，FPLP的降血糖作用可能与其通过激活db/db小鼠肝脏IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β/GS信号通路并调节肝糖原代谢关键酶GK，PEPCK和G6Pase的mRNA和蛋白表达，改善肝糖原代谢，增加肝糖原合成，提高葡萄糖利用效率有关。此外，FPLP可以缓解高脂饮食诱导的胰岛素抵抗和血脂代谢紊乱，可能与其缓解高脂饮食导致的肠粘膜屏障的破坏和降低肠道微生物中厚壁菌/拟杆菌比例以及增加Akkermansia muciniphila的丰度有关。