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目的:筛选特发性血小板减少性紫癜初治患者外周血细胞中微小RNA(microRNA,miRNA)的差异性表达,为建立新的ITP基因诊断、预后评价体系和确立新的分子治疗靶点提供理论和实践依据。方法:抽取5名初治特发性血小板减少性紫癜患者及5名健康体检对照者外周EDTA抗凝静脉血3ml,运用1×红细胞裂解液分离外周血单个核细胞,要求每个样本中细胞数≥106个。利用trizol等相关实验试剂进行各样本中总RNA的抽提。ND-1000分光光度计检测总RNA浓度及纯度,凝胶电泳验证RNA完整性。利用Exiqon公司生产的miRCURYTM探针试剂盒进行总RNA中miRNA标记。各组样本充分混合后采用Exiqon公司生产含1891条探针的miRCURYTM芯片对两组样品进行杂交。杂交后利用AxonGenePix4000B芯片扫描仪进行扫描,同时应用GenePix pro V6.0分析其强度,并对强度≥50的miRNA进行数据标准化,应用MEV软件(v4.6, TIGR)进行分层聚类.分析两组miRNAs差异性表达情况。最后利用RT-PCR技术进行相关结果验证。结果:ITP组与正常对照组外周血细胞间差异表达的miRNAs共筛选出159个,其中有79个miRNAs显著表达上调,有80个miRNAs显著表达下调。选取3个miRNAs进行RT-PCR验证,其中miR-31表达明显上调,miR-181a表达明显下调,miR-148a亦表达明显下调,分别进行RT-PCR验证后均与miRNA芯片分析结果相符。结论:1.通过高通量miRNA基因芯片技术对ITP患者外周血细胞进行筛选,发现ITP患者miRNA与正常人存在差异性表达,其中显著上调miRNAs79个,显著下调miRNAs80个,通过RT-PCR验证后与miRNA芯片筛选结果相一致,证明miRNA芯片技术的可靠性及准确性。2.可以尝试利用miRNA差异表达模式建立ITP诊断的生物标志物指标,从基因组水平建立ITP的特异性生物学诊断体系。3.通过miRNA差异表达可能发现新的与免疫调控、血小板生成相关的调控基因。4.为ITP的治疗提供了新的分子治疗靶点的依据。