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目的：建立大鼠利多卡因脊髓神经毒性模型，观察鞘内注射高浓度利多卡因时大鼠痛阈、脊髓凋亡、脊髓Cav3.2mRNA及其蛋白表达、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Caspase-3)表达的变化和鞘内注射Cav3.2反义寡聚核苷酸(Cav3.2-AS)对其影响，探讨Cav3.2T型钙通道在其中的作用。 方法：第一部分建立大鼠利多卡因脊髓神经毒性模型。 雄性SD大鼠40只，体重230～270 g，采用随机数字表法随机分为5组(n=8)：正常大鼠组(C组)、溶媒组(D组)、5％利多卡因组(L5组)、10％利多卡因组(L10组)、15％利多卡因组(L15组)。D组、L5组、L10组和L15组分别鞘内注射1％二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide，DMSO)、5％、10％、15％利多卡因20μl。分别在鞘内置管前、鞘内给药前、鞘内给药后2h、4h、8h、12h、1d、2d、3d、4d、5d、6d、7d测定机械缩足阈值(mechanical withdrawal threshold，MWT)和热缩足潜伏期(thermal withdrawal latency，TWL)，记录给药后第7d仍有后肢瘫痪的大鼠例数。并取大鼠脊髓做病理切片，观察大鼠脊髓神经元的变化。 第二部分 Cav3.2在大鼠利多卡因脊髓神经毒性中的作用 雄性SD大鼠72只，体重230～270 g，随机分为6组(n=12)：Ⅰ组(空白对照组)；Ⅱ组(DMSO组)；Ⅲ组(10％利多卡因组)；Ⅳ组(Cav3.2-AS+10％利多卡因组)；Ⅴ组(Cav3.2-MM+10％利多卡因组)；Ⅵ组(NS+10％利多卡因组)。Ⅰ组不作任何处理，Ⅱ～Ⅵ组大鼠行鞘内置管，置管后第5天Ⅳ～Ⅵ组分别鞘内注射12.5μg/lOμl的Cav3.2-AS、Cav3.2错义寡聚核苷酸(Cav3.2-MM)或NS10μl，连续4d，每天2次；第9天Ⅱ组鞘内注射1％DMSO20μl，其余四组则注射10％利多卡因20μl。分别于鞘内置管前、最后一次鞘内给药前、给药后12h、1d～4d测定MWT和TWL。随机取4只大鼠脊髓腰骶段TUNEL法检测细胞凋亡，4只用免疫印迹法(Western blot)检测Cav3.2和Caspase-3蛋白表达，4只用RT-PCR法检测Cav3.2mRNA的表达。 结果：第一部分 L15组有三只大鼠给药后7d仍有一侧后肢瘫痪。 与C组比较，D组给药后MWT、TWL无明显变化(P>0.05)，L5组给药后2h～8hMWT升高、TWL延长(P<0.05)，L10组给药后2h～3d MWT升高、TWL延长(P<0.05)，L15组给药后2h-4d MWT升高，2h-5d TWL延长(P<0.05)。 脊髓病理切片显示，L5、L10、L15组脊髓神经元发生不同程度结构破坏，尼氏小体减少，细胞破裂，细胞核裂解，以L15组大鼠细胞损伤最严重。 第二部分 行为学变化与Ⅰ组相比，Ⅱ组给药后各时点MWT、TWL差异无统计学意义(P>0.05)，Ⅲ、Ⅴ和Ⅵ组大鼠给药后12h～3d MWT升高、TWL延长(P<0.05)，Ⅳ组大鼠给药后12h～2d MWT升高、TWL延长(P<0.05)；与Ⅲ、Ⅴ和Ⅵ组比较，Ⅳ组给药后12h～2d TWL缩短(P<0.05)。 TUNEL结果与Ⅰ组比较，Ⅱ组大鼠神经元凋亡指数(apoptosis index，AI)差异无统计学意义(P>0.05)，Ⅲ～Ⅵ组 AI明显增高(P<0.05)；与Ⅲ、Ⅴ和Ⅵ组相比，Ⅳ组AI明显降低(P<0.05)。 Cav3.2蛋白表达与Ⅰ组比较，Ⅱ、Ⅳ组大鼠Cav3.2蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)，Ⅲ、Ⅴ和Ⅵ组明显增高(P<0.05)。 Caspase-3蛋白表达与Ⅰ组比较，Ⅱ组Caspase-3蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)，Ⅲ～Ⅵ组明显增高(P<0.05)；与Ⅲ、Ⅴ和Ⅵ组相比，Ⅳ组明显降低(P<0.05)。 Cav3.2mRNA的表达与Ⅰ组比较，Ⅱ大鼠Cav3.2mRNA差异无统计学意义(P>0.05)，Ⅲ～Ⅵ组明显增高(P<0.05)；与Ⅲ、Ⅴ和Ⅵ组相比，Ⅳ组大鼠Cav3.2mRNA明显降低(P<0.05)。 结论：鞘内注射10％利多卡因适合用于建立大鼠局麻药脊髓神经毒性模型；鞘内注射10％利多卡因可使大鼠脊髓Cav3.2mRNA和蛋白表达增高，细胞凋亡增多；鞘内注射Cav3.2反义寡聚核苷酸可抑制大鼠脊髓Cav3.2表达，改善利多卡因引起的行为学障碍，减少脊髓凋亡，提示脊髓Cav3.2T。型钙通道参与鞘内注射利多卡因致大鼠脊髓神经毒性的过程。