论文部分内容阅读
目的：内分泌治疗能有效抑制乳腺癌复发和转移,是目前乳腺癌治疗的有效措施。该治疗由于造成雌激素水平较正常水平明显下降,继而出现骨钙质减少和骨质疏松。因芳香化酶抑制剂是绝经后患者内分泌治疗的首选用药,使用芳香化酶抑制剂的患者不可避免的伴有肌肉、关节疼痛甚至骨折等症状,严重影响患者的生存质量,它的防治已成为迫切需要解决的问题。中医利用整体观念和辩证论治的方法,对诊治这类疾病有着独特的优势,可以使患者有更好的治疗依从性。本研究通过实验模拟绝经后乳腺癌患者进行乳腺癌手术,在术后给予芳香化酶抑制剂进行内分泌治疗的临床实际情况；先对小鼠进行卵巢去势,后切除乳腺癌肿瘤,再予阿那曲唑内分泌治疗并通过补肾健脾方进行干预,观察其对内分泌治疗后骨质疏松的疗效,探讨其减少骨质流失的机制。同时,观察补肾健脾方辅助治疗乳腺癌的效果,并探讨其可能的作用机制。方法：取雌性4月龄BALB/c小鼠90只,除假去势组外,其余各组均切除卵巢建立去势模型。8周后取小鼠乳腺癌细胞株4T1接种于小鼠右侧腋下。接种后3周选择表皮肿瘤直径大于0.3cm的小鼠,作肿瘤姑息性手术,对切除的肿瘤组织进行病理分析。术后1周选取未见明显肿瘤复发的小鼠进行分组和灌药,每组10只。假去势组和空白组以20ml/kg BW/d的剂量灌服生理盐水,对照组以0.15mg/kg BW/d的剂量灌服阿那曲唑混悬液,阿仑膦酸钠组灌服0.15mg/kg BW/d的阿那曲唑和1.5mg/kg BW/d的阿仑膦酸钠混悬液,补肾健脾方组灌服0.15mg/kg BW/d的阿那曲唑混悬液和33.5g/kg BW/d的补肾健脾方汤药,联合用药组灌服0.15mg/kg BW/d的阿那曲唑混悬液、1.5mg/kg BW/d的阿仑膦酸钠混悬液和33.5g/kg BW/d的补肾健脾方汤药,连续灌药4周。小鼠最后一次用药后24小时,眼眶取血离心分离血清,用于雌二醇和碱性磷酸酶浓度测定；取完血后小鼠处死,切除接种处复发肿瘤组织,称重,进行病理分析；取出小鼠的双侧股骨和胫骨,剔除附着的肌肉和软组织,左侧股骨用于离体骨密度检测,右侧股骨和胫骨用于骨钙和骨磷测定。结果：1.假去势组与空白组、对照组、阿仑膦酸钠组、补肾健脾方组、联合用药组的E2水平分别为58.98±7.89(pg/ml)、25.43±5.36(pg/ml)、12.83±3.05(pg/ml)、11.52± 1.99(pg/ml)、12.93±2.65(pg/ml)、13.35±3.06(pg/ml)。结果说明,去势造模成功,且经内分泌药物治疗能进一步降低E2水平；去势后各用药方案未对E2水平产生影响。2.假去势组与空白组、对照组、阿仑膦酸钠组、补肾健脾方组、联合用药组的骨密度水平分别为0.239±0.038 mg/cm2、2.0.203±0.018 mg/cm2、0.201±0.010mg/cm2、0.234±0.010 mg/cm2、0.207±0.009mg/cm2、0.237±0.007mg/cm2.ALP水平分别为4.86±1.01ng/ml、6.23±0.67ng/ml、6.57±0.61 ng/ml、5.09±0.39 ng/ml、6.01±0.12 ng/ml.4.96±0.10ng/ml。骨钙含量分别为61.6±6.0 mg/g、52.51±5.62mg/g、51.43 ±6.92 mg/g、58.87±6.00 mg/g、52.19±5.14 mg/g、59.23±3.83 mg/g；骨磷含量分别为30.46±3.45 mg/g、25.31±3.13 mg/g、24.03±3.63mg/g、28.45±4.53mg/g、25.02 ±3.33 mg/g、28.63±6.27mg/g。结果说明,补肾健脾方能显著减少ALP含量,虽无明显减少骨质流失的作用,但有改善骨质流失的趋势；补肾健脾方联合阿伦磷酸钠能显著提高内分泌药物治疗小鼠骨密度、骨钙、骨磷水平,防治骨质疏松。3.假去势组与空白组、对照组、阿仑膦酸钠组、补肾健脾方组、联合用药组的休眠率分别为0%、20%、10%、20%、50%、60%。对照组、阿仑膦酸钠组、补肾健脾方组、联合用药组的抑瘤率分别为-13.58%、0%、45.68%、54.32%。使用补肾健脾方组(补肾健脾方组、联合用药组)的抑瘤率比非使用补肾健脾方组(对照组和阿仑膦酸钠组)都有大幅的上升。联合用药组抑瘤率较补肾健脾方组高,但无显著差异(P>0.05)。结果说明,补肾健脾方联合阿那曲唑能加强抑制肿瘤的复发。4.各组用药前的ER免疫组化结果都显示阴性。但是用药后,复发小鼠切除的肿瘤组织中,非使用补肾健脾方组的结果仍为阴性,使用补肾健脾方组的部分结果显示弱阳性。各组用药前、用药后的PR免疫组化结果都显示阴性。结果说明,补肾健脾方对PR的表达不产生影响,而对ER的表达有一定的促进作用。结论：补肾健脾方具有辅助改善乳腺癌内分泌治疗致骨丢失小鼠骨代谢的作用。补肾健脾方通过上调ER的表达,使癌细胞对雌激素敏感,从而提高芳香化酶抑制剂治疗乳腺癌效果。