塞来昔布联合匹伐他汀对人结肠癌SW480细胞增殖与凋亡的研究

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目的:研究塞来昔布(CXIB)联合匹伐他汀(PTV)对人结肠SW480细胞增殖与凋亡的影响,初步探讨其机制。方法:体外培养结肠癌细胞株SW480至对数生长期,分别用不同的浓度的CXIB、PTV及CXIB与PTV联合作用于人结肠癌SW480细胞一定时间后,用四氮唑盐比色法(MTT)对细胞增殖抑制率进行测定,流式细胞术(Flow cytometryassay)检测细胞凋亡, RT-PCR法观察细胞磷酸化Akt(PAkt)、环氧合酶-2(COX-2)mRNA表达,Western-blot法检测PAKT,COX-2蛋白表达。结果: CXIB与PTV均能抑制结肠癌细胞株SW480增殖,呈时间和剂量依赖效应;与单独用药组相比,联合用药组的抑制率明显较高(P<0.01),金正均法提示q>1.15,表明两药联合应用有协同抑制结肠癌细胞的增殖的效应,呈时间依赖性;流式细胞术检测显示CXIB(45μM),PTV(25μM)和两药联合作用于SW480细胞48h后,三组细胞凋亡率分别为10.28%±2.84%,14.32±4.59%,31.54±4.38%,与对照组相比,细胞凋亡率显著增强(P<0.05);CXIB联合PTV组比单用药组的细胞凋亡率明显增高(P<0.01)差异有显著性。CXIB、PTV及二者联合应用均显著抑制SW480细胞PAKT的mRNA和蛋白以及COX-2mRNA和蛋白表达(P<0.05),联合用药组与单一用药组相比差异有显著性(P<0.01)。结论: CXIB与PTV联合应用对结肠癌SW480细胞有抑制增殖作用,且能诱导其凋亡,两种药物具有较强的协同作用;其诱导细胞凋亡的机制可能是抑制SW480细胞中COX-2、PAkt基因及其蛋白的表达,通过PI3K/Akt/COX2通路诱导SW480细胞凋亡。
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