卵巢癌患者肿瘤浸润γδT细胞受体Vδ基因CDR区短肽与肿瘤细胞特异性结合的研究

来源 :中国协和医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:UserReg
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该课题组在对γδT细胞在抗肿瘤免疫中的作用及其机制的研究中发现,从肿瘤组织中扩增得到的肿瘤组织浸润的γδT淋巴细胞(γδTIL)的γδTCR V区具有肿瘤抗原特异性.我们将卵巢上皮癌患者组织进行分析,发现TCR δ链CDR<,3>基因亚型多呈多克隆表达,具有长度多样性,与Ig重链的CDR<,3>区相似,在TCR γδ的抗原识别过程中具有重要的意义.我们根据实验室基因测序结果,推导出相应的γδ TIL TCRδ链CDR<,3>短肽的氨基酸序列.依据片段的长度及等电点等,从卵巢癌肿瘤组织的γδTIL TCRδ链CDR<,3>短肽中选择合成命名为OT<,10>和OT<,3>二条CDR<,3>短肽用于TCR的分析与鉴定.该实验在上述工作的基础上,将人工合成的CDR<,3>短肽OT<,10>和OT<,3>用生物素标记,以卵巢癌肿瘤细胞株细胞和多种其它非卵巢癌肿瘤细胞株细胞为材料,以正常人外周血单个核细胞(PBMC)为对照,通过免疫荧光染色流式细胞仪分析技术和激光共聚焦扫描显微镜技术定性以及半定量的检测OT<,10>和OT<,3>与完整卵巢癌肿瘤细胞株细胞结合的特异性,以期初步探讨γδT细胞识别卵巢上皮癌抗原的机制.
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该研究应用三氧化二砷及苦参碱联合逆转有多药耐药表型的人白血病细胞株K562/ADM对阿霉素的耐药性,观察联合用药逆转耐药的疗效,并从P-糖蛋白介导的药物转运能力的改变及细胞内药物代谢相关物质解毒功能的改变两方面探讨共逆转机制,旨在为临床逆转MDR提供新的策略及理论依据.1.三氧化二砷和苦参碱均是有效的抗肿瘤药,且K562/ADM对其不具耐药性,非细胞毒性剂量的两药联合时无毒性的叠加.2.非细胞毒性
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