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目的:探讨抗纤维化药物吡非尼酮对转化生长因子(transforming growth factorβ1,TGF-β1)刺激下的小鼠间充质细胞C3H10T1/2细胞的增殖、迁移和肌成纤维分化的作用;并探讨细胞分裂周期蛋白7(cell division cycle 7,Cdc7)的小分子抑制剂XL413联合吡非尼酮的抗纤维化作用。方法:CCK8法检测TGF-β1、吡非尼酮和XL413对C3H10T1/2细胞增殖的影响;乳酸脱氢酶实验检测吡非尼酮和XL413对C3H10T1/2细胞的细胞毒性;倒置相差显微镜观察吡非尼酮和XL413对C3H10T1/2细胞形态学的影响;碘化吡啶(propidium iodide,PI)染色和流式细胞仪检测细胞周期变化;侵袭小室和划痕实验检测吡非尼酮对细胞迁移的影响;Real-time PCR检测α-SMA、cyclinD1和Cdc7的mRNA的表达;Western blot方法检测Cdc7、α-SMA、Smad2、p-Smad2和Smad4蛋白表达的变化。构建Cdc7质粒和小干扰RNA技术过表达和敲低C3H10T1/2细胞的Cdc7表达,并检测其对细胞增殖的影响;免疫荧光染色和激光共聚焦显微镜检测α-SMA和Smad2在细胞中的表达,并检测Smad2的细胞核转位。数据以平均值±标准差表示,采用GraphPad Prism version 5软件进行Student’s t检验分析(双尾),P<0.05为差异具有显著性。结果:吡非尼酮呈剂量和时间依赖的方式抑制TGF-β1刺激的C3H10T1/2细胞增殖,并将细胞周期阻滞在G1期;吡非尼酮降低C3H10T1/2细胞Cdc7蛋白的表达;吡非尼酮抑制C3H10T1/2细胞的迁移和运动;吡非尼酮降低C3H10T1/2细胞α-SMA的mRNA和蛋白的表达,并且和降低Smad2、p-Smad2和Smad4蛋白表达有关。Cdc7过表达、敲减和小分子抑制剂XL413单用对C3H10T1/2细胞的增殖没有影响。和单用吡非尼酮相比,XL413联合吡非尼酮使用后抗TGF-β1刺激的C3H10T1/2细胞增殖作用增强,α-SMA表达降低;XL413联合吡非尼酮降低cyclinD1 mRNA的表达和Smad2、p-Smad2和Smad4蛋白的表达,并且可以抑制Smad2的细胞核转位。结论:吡非尼酮抑制TGF-β1刺激的C3H10T1/2细胞的增殖、迁移和肌成纤维分化。Cdc7抑制剂XL413通过调节Smad2/4增强吡非尼酮的抗纤维化作用。XL413联合吡非尼酮可能是TGF-β1相关纤维化疾病的潜在治疗靶点。