【摘 要】
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甜樱桃是我国北方落叶果树中果实成熟最早的树种,国内种植面积和产量都位居世界第一。甜樱桃砧木的选择在很大程度上决定了甜樱桃栽培的成败,砧木不仅影响甜樱桃产量和品质,还影响其适应性和抗逆性。与苹果等其他果树相比,甜樱桃砧木遗传转化条件苛刻,转化效率极低。迄今为止,甜樱桃砧木外植体再生系统方面的研究较少,急待建立高效、稳定的再生转化体系。本试验以目前广泛栽培应用的三倍体甜樱桃矮化砧木“吉塞拉6号”和新品
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甜樱桃是我国北方落叶果树中果实成熟最早的树种,国内种植面积和产量都位居世界第一。甜樱桃砧木的选择在很大程度上决定了甜樱桃栽培的成败,砧木不仅影响甜樱桃产量和品质,还影响其适应性和抗逆性。与苹果等其他果树相比,甜樱桃砧木遗传转化条件苛刻,转化效率极低。迄今为止,甜樱桃砧木外植体再生系统方面的研究较少,急待建立高效、稳定的再生转化体系。本试验以目前广泛栽培应用的三倍体甜樱桃矮化砧木“吉塞拉6号”和新品种四倍体“矮杰”的茎段和叶片为外植体,探究不同类型和不同浓度生长素与细胞分裂素对甜樱桃砧木再生的影响。（1）我们选用生长素IBA、2,4-D和细胞分裂素ZT、6-BA进行两两组合（IBA+ZT;IBA+6-BA;2,4-D+ZT;2,4-D+6-BA）,浓度分别为0 mg/L、0.1 mg/L、0.5 mg/L、1.0mg/L和2.0 mg/L。实验结果显示“矮杰”的器官再生能力强于“吉塞拉6号”,同时发现以“矮杰”茎段为外植体诱导时,愈伤组织再生能力和生根能力较强,0.5 mg/L IBA+2.0 mg/L ZT为最佳生根激素组合,生根频率达到94%;其中2.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L6-BA组合诱导“矮杰”茎段产生的愈伤组织频率最高、愈伤组织质量较好且褐化频率较低。2.0 mg/L IBA+2.0 mg/L 6-BA组合诱导“矮杰”叶片产生的A形态Ⅱ型愈伤组织质量最佳;2.0 mg/L IBA+0.5 mg/L ZT组合诱导“矮杰”叶片产生的B形态Ⅱ型愈伤组织质量最佳。（2）“矮杰”和“吉塞拉6号”的茎段和叶片经不同激素处理均可以诱导出三种不同形态的愈伤组织,分别是Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型。Ⅰ型愈伤组织结构致密,表面坚硬且呈深绿色或黑色,苏丹红染色较浅;Ⅱ型愈伤组织结构松散易碎,细胞排列整齐、细胞质浓,颜色为黄色或淡黄色,苏丹红染色为橙红色;Ⅲ型愈伤组织结构柔软,细胞排列无序并存在大量间隙、细胞质稀或解体表面呈水渍状,颜色为淡黄色透明状或半透明状,苏丹红不易染色。体视镜和组织切片观察发现A形态Ⅱ型愈伤组织沿刀口均匀生长,B形态Ⅱ型愈伤组织主要在叶脉刀口处成簇生长。对以上三种愈伤组织的胚胎发育相关基因进行检测,结果发现Ⅱ型愈伤组织中胚胎标记基因Pa LEC2和Pa SECK的表达量远远高于其他类型的愈伤组织,因此推测Ⅱ型愈伤组织有可能是胚性愈伤组织。综上所述,本试验通过研究不同浓度和种类的生长素和细胞分裂素对甜樱桃砧木“矮杰”和“吉塞拉6号”离体再生的影响,完善了甜樱桃砧木再生体系,为后续工厂化大量繁育优质甜樱桃矮化砧木的种苗和脱毒苗提供了实验依据,同时也为甜樱桃砧木的遗传转化研究建立理论基础。
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