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目的: RSV是引起5岁以下婴幼儿下呼吸道感染的主要病原。婴幼儿时期RSV感染与儿童持续喘息和AHR密切相关,特别是重症RSV感染。重症RSV感染患儿常合并下呼吸道细菌感染,且感染以革兰阴性菌为主。脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)是革兰阴性菌主要成分,本课题组前期体外研究结果示,用LPS刺激感染RSV后的上皮细胞,增加了上皮细胞的IL-6表达,然而在体内LPS对RSV感染的影响还不清楚,本研究成功建立RSV感染后,LPS再刺激的小鼠动物模型,观察了其对小鼠气道炎症及气道高反应性(Airway hyperreactivity,AHR)的影响,并探讨了其影响机制。方法:将6-8周龄雌性BALB/c小鼠分为4组:对照组、LPS组、RSV组及RSV+LPS组,于RSV感染后第5、7、14天收取肺泡灌洗液、肺组织标本。Q-PCR检测肺组织病毒拷贝数,计数BALF中细胞总数及分类计数,H&E染色观察肺部病理损伤,肺功能测定AHR,Western blotting检测TRIF和MyD88蛋白表达,ELISA检测BALF中IFN-γ、KC、MMP-9、IL-6浓度。结果:病毒拷贝数:RSV+LPS组小鼠肺组织中病毒拷贝数未较RSV组升高。细胞计数及分类计数:LPS组、RSV组、RSV+LPS组BALF中细胞总数在RSV感染后第5、7、14天均较对照组明显增多,LPS组以中性粒细胞为主,RSV组以淋巴细胞为主,RSV+LPS组以中性粒细胞为主。肺组织病理:LPS组、RSV组在RSV感染后第5、7天肺组织病理有明显炎症细胞浸润,第14天炎症明显减轻,而RSV+LPS组肺组织病理在第5、7、14天均存在不同程度炎症细胞浸润。AHR:LPS组小鼠仅在第5天检测到AHR,RSV组、RSV+LPS组小鼠在5、7、14天AHR均升高,且RSV+LPS组小鼠AHR在各时间点较RSV组升高,在第14天最明显。TRIF和MyD88表达:在RSV感染后第7天,RSV+LPS组肺组织中TRIF表达较对照组明显增加,LPS组、RSV组TRIF表达较对照组增加。MyD88各组变化较对照组均不明显。细胞因子:LPS组小鼠BALF中以KC、MMP-9表达为主,RSV组以IFN-γ表达为主,RSV+LPS组以IFN-γ、KC、MMP-9表达为主,且RSV+LPS组高表达KC、MMP-9持续时间更长。结论:1、LPS刺激可加重RSV感染小鼠气道炎症及AHR;2、LPS刺激加重RSV感染小鼠气道炎症及AHR可能是通过TRIF--KC/MMP-9途径,募集中性粒细胞造成肺组织损伤所致。