恩拉霉素是一种多肽类抗生素,动物饲料添加剂,对动物有很好的促生长作用。天方药业有限公司恩拉霉素发酵生产中存在效价偏低的问题。针对该问题,本文进行了恩拉霉素高产菌株筛选及发酵条件优化研究。取得以下主要研究成果:1.对恩拉霉素产生菌杀真菌链霉菌BKSFJ06进行亚硝基胍与紫外的复合诱变,在含有四种不同梯度恩拉霉素抗性平板上初筛选到80株突变株,经过复筛挑选出9株突变株,经过多次遗传稳定性试验,挑出1株恩拉霉素高产菌株ERS42-1,最高摇瓶发酵效价达到8400±86u/mL,相比出发菌株高出13.5%。2.采用对单因素实验的方法对突变株ERS42-1的发酵培养条件和发酵培养基成分进行了优化。在摇瓶上考察了种龄、接种量、装液量、发酵液初始pH值、发酵培养温度和培养时间对恩拉霉素产量的影响,确定了各自最优条件为:种龄,48h;接种量,10%;装液量,40mL/500mL;初始pH值,7.0;发酵温度,30℃;培养时间,10d。并使用Plackett-Burman实验设计对恩拉霉素摇瓶初始发酵培养基中的8个因素的最佳水平进行评价,结果表明棉籽饼粉、麸质粉和磷酸二氢钾对恩拉霉素产量影响显著。用最陡爬坡试验逼近关键因素的最大响应区域,通过中心组合试验和响应面法优化分析得到最佳发酵培养基为:玉米粉175g/L,玉米浆1 g/L,麦芽糊精70 g/L,棉籽饼粉8.9 g/L,麸质粉55 g/L,磷酸二氢钾0.06 g/L,硫酸铵5g/L,豆油20g/L。采用优化后的摇瓶发酵工艺,突变株ERS42-1发酵摇瓶效价提高到12066±106u/mL,较原发酵工艺产能提高了45.4%。3.利用200L发酵罐进行突变株ERS42-1产能验证试验,通过发酵过程中代谢参数的比较发现,突变株恩拉霉素的产量最高可达12000±96u/mL,较出发菌株提高62.2%。