论文部分内容阅读
传染性海绵状脑病(TSEs)又称为朊病毒病,是一种致死性、神经退行性疾病,该病以脑组织空泡化、神经元死亡和神经小胶质细胞增生为主要特征。该病是由于正常细胞朊蛋白(PrPc)构象发生了变化,转变为致病型(PrPSc)而引起的。轴突变性是许多神经退行性疾病所具有的共同特征。也有报道称哺乳动物朊病毒蛋白质淀粉样原纤维可以诱导人卵巢畸胎瘤细胞分化晚期所形成的神经元出现轴突退化。然而,在神经退行性疾病中轴突变性的机制还不是完全清楚。死亡受体6属于肿瘤坏死因子受体,类似于其他肿瘤坏死因子受体家族成员,死亡受体6在神经元分化和凋亡过程中大量表达。我们猜测在传染性海绵状脑病中神经元发生了轴突变性,并且在轴突变性过程中死亡受体6参了与轴突的退化过程。为了证实这个猜想,我们研究了prp106-126诱导的大鼠脊髓神经元轴突变性神经元的分子机制,探索死亡受体6在轴突变性中的作用以及其下游的激活机制。结果表明：1.脊髓神经元在毒性多肽PrP106-126作用下,脊髓神经元的细胞骨架严重受损,神经元轴突大量消失,轴突远端微管出现断裂,微管蛋白聚集明显。表明神经元在PrP106-126作用下,通过破坏细胞内微管结构导致神经元轴突发生变性。2.脊髓神经元在PrP106-126作用下,在神经元轴突发生变性,在神经元大量死亡的同时,细胞内死亡受体6蛋白水平显著增高。对神经元DR6进行敲除后,可以很好的阻止神经元由于毒性多肽PrP106-126引起的轴突变性。我们证明DR6对脊髓神经元轴突变性存在决定性的调控作用。3.脊髓神经元在PrP106-126作用下,细胞内Caspase3、Caspase6被激活。Caspase3在神经元胞体大量表达,轴突内几乎无表达；Caspase6在神经元轴突和胞体大量表达。将Caspase3、 Caspase6抑制后,在PrP106-126作用下,Caspase3被抑制组的神经元胞体基本完整但轴突发生明显变性,Caspase6被抑制组的神经元胞体与轴突都较为完整。Caspase3、Caspase6的SiRNA结果与抑制效果相同。结果表明,在PrP106-126作用下,Caspase6对脊髓神经元轴突发生变性起调节作用。4.在DR6被干扰后,神经元的Caspase6激活也会受到抑制；PrP106-126作用于DR6干扰组神经元也未出现Caspase6激活的现象,相似的,DR6干扰的存在也会抑制神经元Caspase3的激活。结果表明：caspase6的细胞凋亡信号调控通路位于DR6的下游,DR6和Caspase6在轴突退化中起到调节作用。5.PrP106-126作用的脊髓神经元中加入Nmnatl后,可在12个小时之内有效地保护轴突免于变性,24小时之后作用明显减弱；但Nmnatl不能有效的抑制Caspase6的表达；因此,上述结果表明,Nmnatl对脊髓神经元轴突的保护作用可能与Caspase6的激活通路无关。