论文部分内容阅读
目的骨髓增殖性肿瘤(myeloproliferative neoplasm, MPN)包括慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia, CML)、血小板增多症(essentia thrombocythemia, ET)、真性红细胞增多症(polycythemia vera, PV)及原发性骨髓纤维化(primary myelofibrosis, MF)。目前研究证实95%的CML患者存在Bcr/Abl融合基因,50%的ET和65%-97%的PV患者存在JAK2V617F基因突变。在CML、ET、PV等疾病进展中常继发骨髓纤维化,且Bcr/Abl融合基因与JAK2V617F基因突变患者易继发骨髓纤维化,致临床疗效差,预后不良,形态学表现为异形性巨核细胞。本课题收集近三年的‘165例CML、ET、PV患者的临床资料,观察骨髓涂片、骨髓切片中巨核细胞形态学特征；并探讨Bcr/Abl融合基因和JAK2V617F基因对巨核细胞形态的影响；分析外周血常规(HB、WBC、 PLT)及巨核细胞随骨髓纤维化变化的趋势。方法1、收集山西医科大学第二医院2009年1月至2012年8月确诊为CML、 ET、PV的门诊和住院患者165例。2、通过Olympus BX-51光学显微镜观察骨髓细胞涂片和骨髓组织切片。参照卢兴国等提出的分型标准,将骨髓巨核细胞形态分为七类,分别为Ⅰ型(单个核巨核细胞)、Ⅱ型(多个核巨核细胞)、Ⅲ型(多分叶巨核细胞)、Ⅳ型(分叶不好巨核细胞)、V型(大核小核巨核细胞)、Ⅵ型(巨核细胞簇)、Ⅶ型(骨小梁旁巨核细胞)。3、依据WHO分类标准、临床分期慢性期(CP)、加速期(AP)、急变期(BP)]、Bcr/Abl融合基因(b3a2/b2a2)及JAK2V617F基因突变,将165例患者进行分组(具体分组详见正文实验方法)。4、研究Bcr/Abl融合基因和JAK2V617F基因对巨核细胞形态的影响差异。5、分析外周血常规(HB. WBC. PLT)及巨核细胞中位数随骨髓纤维化变化的趋势。6、实验数据用SPSS20.0软件进行分析。结果1、骨髓切片和骨髓涂片CML (CP、AP、b3a2组)、ET (JAK2V617F基因未突变组)、PV (JAK2V617F突变组与未突变组),六组内巨核细胞均伴异形性改变,差异无统计学意义(P>0.05)。2、骨髓切片中多个核型巨核细胞(P=0.023,P<0.05)在CML BP组差异有统计学意义。巨核细胞簇(P=0.024,P<0.05)和骨小梁旁巨核细胞(P=0.000,P<0.05)、巨核细胞簇(P=0.030,P<0.05)分别在CML融合基因b2a2组、ET伴JAK2V617F基因突变组有统计学差异。3、骨髓涂片中多分叶巨核细胞(P=0.033,P<0.05)在CML融合基因b2a2组中差异有统计学意义(p<0.05)；大核小核型巨核细胞(P=0.004,P<0.05)和分叶不好型巨核细胞(P=0.016,P<0.05)在ET和PV伴JAK2V617F基因突变组中差异有统计学意义。4、骨髓涂片中,巨核细胞数量与骨髓纤维化程度成负相关。5、CML融合基因b3a2组(P=0.009,P<0.05)及CML AP组(P=0.004, P<0.05) HB显著降低,有统计学差异；CML融合基因b2a2组和ET、PV组HB、WBC、PLT差异无统计学意义(P>0.05)。结论1、不同纤维增生程度的CML、PV、ET患者HB、WBC、PLT无明显差异。2. Bcr/Abl融合基因b2a2型CML及JAK2V617F基因突变型ET、PV容易继发骨髓纤维化。3、骨髓巨核细胞异形性改变在CML、ET及PV继发骨髓纤维化的辅助诊断中有重要价值。4、骨髓涂片中多分叶巨核细胞及骨髓切片中巨核细胞簇可作为b2a2型CML患者继发骨髓纤维化早期诊断的参考指标。5、骨髓涂片中大核小核型巨核细胞、分叶不好型巨核细胞以及骨髓切片中骨小梁旁巨核细胞、巨核细胞簇可作为JAK2V617F基因突变型ET患者继发骨髓纤维化早期诊断的参考指标。