丝素蛋白取向电凝胶仿生诱导SF/HA的合成

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背景:羟基磷灰石(HA)是人体硬组织中(骨骼和牙齿)的主要无机相成分,在骨骼中所占比例为65%,可为骨骼提供必需的强度和硬度[1]。在牙釉质中质量所占比例为96-97%[2]。人工合成的HA不仅在成分上与人体组织相同,而且在结构上也与人体组织相似,植入人体内后,在体液作用下,钙、磷会游离出材料表面,被机体组织所吸收,并长出新的组织[3],具有很好的生物相容性和生物活性,能与人体骨组织形成化学键结合[4],并产生骨传导作用,是理想的硬组织替代材料,近20多年来已经被广泛应用于整形外科和牙科领域[5-7]。天然蚕丝蛋白(SF)具有独特的机械性能、生物活性、良好的生物相容性和生物可降解性,且植入人体后不会产生免疫反应等特性。丝素蛋白可以诱导无机矿物盐离子在其表面沉积,如在人体仿生环境下诱导碳酸钙、HA等晶体的形成,并且矿化后的复合材料是一种良好的骨移植材料。目的:在本文的研究中,我们用丝素蛋白取向电凝胶作为模板在模拟体液中仿生诱导羟基磷灰石的合成。并系统的研究了不同浓度的取向电凝胶和预钙化温度对所合成材料的表面形貌和钙磷摩尔比的影响。方法:1.将丝素蛋白浓缩液通过稀释转化成不同浓度的丝素蛋白类凝胶,分别制取质量分数为0.5wt%、1.25wt%、2wt%的三种浓度类凝胶。2.将制备好不同浓度类凝胶通过电泳作用转化为具有一定取向性的丝素蛋白电凝胶。3.将三种浓度的取向电凝胶经过预钙化3次后分别放入模拟体液中静置24h。4.通过改变取向电凝胶浓度(0.5wt%、1.25wt%、2wt%)和改变预钙化温度(10℃、25℃、37℃),观察复合材料表面的形貌特征变化。结果:通过改变取向电凝胶浓度(0.5wt%、1.25wt%、2wt%)和改变预钙化温度(10℃、25℃、37℃),与未经过电场作用的类凝胶仿生矿化诱导生成的HA相比较,表面形貌发生了明显的变化,并且不同浓度和不同温度下仿生矿化后形成的HA形貌也不同,由小球形—交联状—三维孔洞片状结构形貌转变。并对所得材料进行测试表征,FTIR数据结果表明所得材料的无机盐主要是HA;ICP分析材料中的钙磷摩尔比非常接近HA钙磷摩尔比,与人体骨组织和牙体硬组织中的钙磷摩尔比非常接近。SEM和XRD分析所得材料的形貌和结晶度,数据结果表明此方法制备的材料结晶度较低,并且随着浓度的增加和预钙化温度的升高,其晶体沿c轴取向生长,且磷酸盐以自组装的形式沉积在材料表面,材料表面形貌也有小球形结构向三维多孔片状结构转变。结论:本课题以丝素蛋白取向电凝胶作为模板,钙磷离子在精确的调控和指导下,在模板表面成核、沉积结晶,最终形成丝素蛋白取向电凝胶/HA复合材料,且HA晶体在其表面沿c轴取向生长。所制备的复合材料在组成、结构上及形貌上与人体骨组织和牙体硬组织相似。因此,用丝素蛋白取向电凝胶仿生诱导合成的SF/HA有望为组织工程、整形外科和牙科领域提供一种性能优良的修复材料。
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