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目的:用不同浓度大蒜素和顺铂作用于体外培养的人上皮性卵巢癌耐顺铂细胞株(SKOV-3/DDP),观察细胞株的生长情况及其超微结构和细胞周期的改变,探讨大蒜素对体外培养的人上皮性卵巢癌耐顺铂细胞株(SKOV-3/DDP)的作用,以期为临床治疗耐顺铂上皮性卵巢癌患者提供新的辅助治疗方案。方法:体外培养人上皮性卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV-3/DDP,细胞生长至对数生长期后,调整细胞密度为5×l04/ml置于24孔板中培养,测细胞的生长曲线,用MTT法检测不同浓度(0.625～50μg/ml)的大蒜素和不同浓度(0.625～50μg/ml)的顺铂对SKOV-3/DDP细胞株的增殖抑制作用,用透射电子显微镜观察大蒜素作用后SKOV-3/DDP细胞的超微结构,用流式细胞仪检测大蒜素作用后SKOV-3/DDP细胞的细胞周期的改变。结果:(1)体外培养的SKOV-3/DDP细胞的生长曲线:观察SKOV-3/DDP细胞的生长曲线,前5天,细胞增殖活跃,第5天后细胞增殖进入平台期。(2)大蒜素对SKOV-3/DDP细胞增殖的影响:大蒜素对SKOV-3/DDP细胞的生长有明显的抑制作用,且呈剂量和时间依赖性,顺铂对SKOV3/DDP细胞体外生长亦呈现时间-剂量依赖关系,不同浓度的大蒜素作用后光密度值(OD值)与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),OD值可间接反映活细胞的数量,OD值越低,药物对细胞的抑制率越高。同一浓度的大蒜素作用不同时间后的OD值比较差异亦有统计学意义(P<0.05),而相同浓度的大蒜素和顺铂作用相同时间后的OD值比较,大蒜素组的OD值均明显低于顺铂组的OD值,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),大蒜素对SKOV-3/DDP的抑制率也高于顺铂,并随时间的延长而增加。(3)大蒜素对SKOV-3/DDP细胞超微结构的影响:25μg/ml的大蒜素作用24h,可诱导SKOV-3/DDP细胞发生凋亡,电镜下可见典型的凋亡细胞形态学改变。(4)大蒜素对SKOV-3/DDP细胞周期的影响:流式细胞仪分析发现与对照组比较,12.5μg/ml的大蒜素作用24h、48h、72h后G2/M期细胞减少,G0/G1期细胞明显增加,且呈时间依赖性,提示SKOV-3/DDP细胞经大蒜素处理后细胞周期阻滞于G0/G1期。结论:(1)大蒜素和顺铂均能抑制体外培养的人上皮性卵巢癌耐顺细胞株SKOV-3/DDP的生长,抑制作用呈时间-剂量依赖关系,大蒜素对SKOV-3/DDP的抑制率高于顺铂,说明大蒜素对SKOV-3/DDP细胞的抗瘤活性强于顺铂。(2)大蒜素诱导顺铂耐药卵巢癌SKOV-3/DDP细胞凋亡可能是抑制其生长的机制之一(3)大蒜素通过抑制DNA合成作用,使细胞阻滞在G0/G1期。G0/G1期阻滞可能是大蒜素诱导凋亡的机制之一。(4)本研究为临床上应用大蒜素治疗耐顺铂卵巢癌患者提供了可靠的体外实验依据。