CPG在步行训练促进脊髓挫伤大鼠神经功能恢复中的作用研究

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目的:1.明确步行训练对脊髓损伤大鼠运动功能的促进作用2.分析不完全脊髓损伤大鼠运动功能恢复与CPG的关系材料与方法:三月龄雌性SD大鼠44只,用NYU打击器制造脊髓中度挫伤模型,随机分成对照组(A组,n=12)和训练组(B组,n=32),对照组不给予任何干预,训练组在挫伤后1周进行步行训练,训练6周后随机分成2组:继续训练组(B1组,n=12)和脊髓横断组(B2组,n=20)。B1组大鼠继续训练2周, B2组大鼠在T13节段完全横断,制造脊髓全横断模型,然后随机分为对照组(C组,n=10)和训练组(D组,n=10),对照组不给予任何干预,训练组大鼠在全横断1周后进行步行训练。A组和B1组大鼠在脊髓损伤后每周分别行BBB评分和ACOS评分,C组和D组大鼠在脊髓全横断后第7天、10天、14天分别进行BBB评分和ACOS评分。各组大鼠在挫伤后第9周取材进行常规病理染色和5-HT免疫组织化学染色观察损伤尾侧脊髓内5-羟色胺纤维的表达。结果:1. BBB评分B1组大鼠后肢运动功能在步行训练一周后就有明显恢复,第2-3周恢复最快,从第4周开始恢复趋于稳定状态,直至训练后第8周后肢BBB评分达15.38±3.62分。A组大鼠后肢运功功能恢复与实验组相似,在挫伤后2周即与B1组有差异(p﹤0.05),一直持续到训练后第8周。D组大鼠与C组大鼠后肢BBB评分没有出现差异(p﹥0.05)。2. ACOS评分B1组大鼠后肢ACOS评分在步行训练一周后就有明显恢复,第2-5周恢复最快,从第6周开始恢复趋于稳定状态,直至训练后第8周后肢ACOS评分达78.00±10.39分。A组大鼠后肢运功功能在第1周恢复不明显,此后有一定的恢复,在挫伤后2周即与B1组有差异(p﹤0.05),第4-6周恢复最快,6周后趋于平稳状态,一直持续到训练后第8周。D组大鼠与C组大鼠后肢ACOS评分在横断后第10天开始出现差异(p﹤0.05)。3.苏木精-伊红染色苏木精-伊红染色显示各组损伤区均有胶质细胞和脊髓空腔形成,A组较B1组空腔较大,数量较多,形状不规则,并有大量深染的瘢痕胶质细胞贯穿其中;B2组大鼠横断部位脊髓组织破坏严重,有大量的脊髓空腔形成,并有大量胶质细胞贯穿其中。横断组大鼠HE染色可见,断端整齐,有大量空腔及瘢痕胶质细胞。4. 5-羟色胺免疫组织化学染色纵切片:A组和B1组5-羟色胺纤维免疫组化染色显示:两组组损伤区的脊髓组织内都有褐色的阳性纤维再生。B1组大鼠阳性纤维计数为20.25±6.95根/切片,A组大鼠阳性纤维计数为11.00±2.71根/切片,两组比较有明显差异(p﹤0.05)。横切片:A组和B1组5-羟色胺免疫组化结果显示,两组损伤区脊髓组织内都有褐色的阳性神经元,主要集中在脊髓前角。B1组大鼠的阳性神经元的计数为22.75±4.27个/切片,A组大鼠阳性神经元的计数为10.50±1.91个/切片,两组在统计学上有明显差异(p﹤0.01)。结论:1.步行训练能有效促进脊髓挫伤大鼠后肢运动功能的恢复。2.CPG在步行训练促进不完全脊髓损伤大鼠后肢运动功能改善中起主要的作用。3.步行训练能促进脊髓挫伤大鼠损伤尾侧脊髓内5-羟色胺能纤维可塑性,表现为5-羟色胺阳性纤维增多和5-羟色胺阳性神经元密度增高。4.评定脊髓全横断大鼠后肢运动功能时,ACOS评分的敏感性高于BBB评分。
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