鸡热应激蛋白70基因单核苷酸多态性与组织表达的关系

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鸡的热应激蛋白70(Heat Shock Protein 70,HSP70)已被证明在抗热应激过程中发挥重要作用.该试验采用实时荧光定量PCR技术,以华南农业大学鸡QTL定位资源群体88个杏花鸡×隐性白洛克鸡F<,2>代个体及89个杏花鸡×丝羽乌骨鸡F<,2>代个体为试验材料,采集肝脏和腿肌组织进行不同基因型的HSP70基因mRNA定量检测分析;并选用154只阳山鸡作为试验材料,热应激处理令其致死后,分别抽取肝组织、脑组织和腿肌组织进行HSP70基因的mRNA的定量检测分析.并根据杜红丽(2002)所设计的B2引物以187个资源群个体和所有阳山鸡个体的DNA为模板进行扩增,SSCP分析基因型.试验结果表明,A258G和C276G两个多态位点的各种基因型均在试验群体中存在.阳山鸡和丝羽乌骨鸡都是耐热型鸡种,但是该实验中阳山鸡C276G位点上的G等位基因频率与杜红丽(2002)对丝羽乌骨鸡的检测结果有显著差异.杏花鸡×隐性白洛克鸡F<,2>代个体与杏花鸡×丝羽乌骨鸡F<,2>代在肝脏和腿肌组织HSP70 mRNA的表达量差异不显著.肝脏比腿肌有更高的HSP70 mRNA的本体水平表达.阳山鸡在热处理后,脑组织、肝脏和腿肌组织中的HSP70基因mRNA表达量均很高,并且脑组织HSP70 mRNA量比肝脏和腿肌组织高.不同基因型HSP70基因定量检测结果显示,杏花鸡×隐性白洛克鸡F<,2>代个体C276G位点上,CG型肝脏HSP70 mRNA的表达量比CC型、GG型高,且与CC型差异显著(P<0.05);CG型在腿肌的表达量比CC型、GG型高,且与GG型差异显著(P<0.05).杏花鸡×丝羽乌骨鸡F<,2>代中,A258G的AG型在肝脏表达量比其它两种基因型高,且与GG型有极其显著的差异(P<0.01);同时C276G位点CG型的肝脏表达量比CC型、GG型高,且差异都极显著(P<0.01).结果表明资源群不同基因型HSP70 mRNA的表达量在不同组织中有差异.同时结果也发现,杂合子在2种组织中的表达量都比较高.在应激试验中,阳山鸡不同基因型HSP70 mRNA的表达量在脑组织、腿肌和肝脏组织中差异均不显著.其中,杂合子在3种组织种的表达量都比较高.杏花鸡×隐性白洛克鸡F<,2>代单倍型与HSP70 mRNA表达量多重方差分析结果显示,不同单倍型组合之间在2种组织中HSP70 mRNA的表达量差异均不显著.而在杏花鸡×丝羽乌骨鸡F<,2>代单倍型分析结果发现,单倍型组合H1H4在肝脏中HSP70 mRNA的表达量比H1H1、H2H2及H2H4组合均高,且差异显著(P<0.05).应激试验样本中的H2H2组合肝脏表达量比其它4种组合高,且与H1H3、H2H4组合有显著差异(P<0.05).H1H4组合在脑组织和腿肌的表达量最高.结果表明双杂合子的单倍型组合在3种组织中的HSP70 mRNA的表达量都很高.研究结果提示HSP70 mRNA的表达可能具有组织特异性和基因型特异性.
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