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【目的】通过研究维甲酸诱导基因1(RIG1)与肝癌发生发展的关系,并分析miR-362-5p和RIG1之间的结合关系,研究miR-362-5p结合RIG1后,调控PI3K/AKT信号通路,调节微环境的细胞免疫反应,对肝癌细胞侵袭转移的影响。【方法】(1)免疫组织化学方法检测RIG1在肝癌组织和癌旁组织中的表达,分析其与肝癌的临床病理特征的关系;(2)通过生物信息学方法预测能与RIG1基因相互作用的miRNA分子—miR-362-5p;(3)在肝癌组织和癌旁组织中分别用q RT-PCR检测miR-362-5p的表达以及western blot检测RIG1的表达,分析miR-362-5p和RIG1之间的关系;(4)在不同转移潜能的肝癌细胞株中用q RT-PCR技术检测miR-362-5p以及western blot方法检测RIG1、PI3K/AKT相关蛋白的表达,分析肝癌细胞株中miR-362-5p表达与RIG1、PI3K/AKT相关蛋白表达之间的关系;(5)采用双荧光素酶方法证实RIG1是miR-362-5p下游调控的靶基因;(6)研究miR-362-5p结合RIG1后,对PI3K/AKT信号通路、细胞免疫的影响:分别合成miR-362-5pmimic、inhibitor、空白对照组(NC),再分别转染肝癌细胞Hep G2。在重组细胞株中用q RT-PCR检测miR-362-5p的表达,Western blot检测RIG1、PI3K、AKT、IL-2、IL-4、TNF-α等蛋白表达水平,分析miR-362-5p表达和RIG1、PI3K/AKT、IL-2、IL-4、TNF-α蛋白表达之间的相关性;(7)Transwell实验检测miR-362-5p结合RIG1后影响肝癌细胞侵袭转移能力变化。【结果】1.在肝癌组织中RIG1蛋白阳性率为20.0%(10/50),而在癌旁组织中为85.0%(17/20),两者的阳性率有显著性差异(P<0.05);RIG1蛋白表达与性别、年龄、肿瘤最大直径、远处转移无关(P>0.05),与临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05);生物信息学方法分析,发现miR-362-5p与RIG1结合稳定性和特异性都是最好的;肝癌组织中miR-362-5p高表达时,RIG1低表达;而在癌旁组织中,出现miR-362-5p低表达时,RIG1高表达(P<0.05)。2.在肝癌细胞株中miR-362-5p高表达,RIG1低表达,引起PI3K和Akt高表达时,肝癌细胞转移能力强;而miR-362-5p低表达、RIG1高表达时,导致PI3K和Akt低表达时,肝癌细胞转移能力低。miR-362-5p可结合RIG1上的3’-UTR位点,并抑制其表达,RIG1是miR-362-5p下游的靶基因。增加miR-362-5p表达,会抑制RIG1的表达,能够引起肝癌细胞的侵袭转移能力增强;而miR-362-5p低表达,导致RIG1的表达增高,能够引起肝癌细胞的侵袭转移能力下降。【结论】1.RIG1表达与肝癌发生发展有关,RIG1低表达的肝癌细胞具有较强的转移能力。2.miR-362-5p能够结合到RIG1上的3’-UTR位点,调控RIG1的表达。3.RIG1可抑制PI3K/AKT信号通路,恢复微环境中的细胞免疫功能。4.miR-362-5p通过RIG1调控PI3K/AKT通路,抑制细胞免疫功能促进肝癌细胞的侵袭转移。