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目的:检测HIF-1α和PHD2在正常及不同病理条件下的子宫内膜组织中mRNA及蛋白的表达水平,比较正常及不同病理条件下其表达水平之间是否存在差异性,并将子宫内膜腺癌组织中的表达水平与影响子宫内膜癌预后相关的高危因素(如组织学分化、浸润超过1/2肌层厚度、侵犯脉管间隙、肿瘤直径大于2cm、转移至淋巴结及子宫外)进行比较,探讨其间是否存在相关性。旨在为子宫内膜癌的诊断增加评判指标,助于子宫内膜癌的早期诊断、病情评估及术后随访监测,进而改善子宫内膜癌患者的预后。方法:于我院手术室搜集我科2017年06月~2018年12月的子宫内膜组织,其中,30例不典型增生子宫内膜组织来源于因阴道不规则流血行诊断性刮宫术;30例正常子宫内膜组织,源于因非子宫内膜病变行全子宫切除术,均为宫颈CINⅢ病变者(要求均处于分泌期);50例子宫内膜腺癌组织源于因子宫内膜腺癌行分期手术者(均为I型子宫内膜腺癌即子宫内膜样腺癌,均行全子宫双附件切除术、盆腔腹主动脉旁骶前淋巴结清扫术,行中医药、激素、放化疗等治疗后的患者视为排除标准)。正常子宫内膜组织设为对照组,不同病理条件下的子宫内膜(不典型增生和腺癌)组织设为实验组。通过qRT-PCR、Western Blot实验方法检测PHD2和HIF-1α正常及不同病理条件下的子宫内膜组织(离体新鲜组织)中mRNA和蛋白的表达水平;取相对应患者的组织石蜡切片,通过免疫组化(Envision二步法)检测PHD2和HIF-1α蛋白的表达水平。采用相关性分析方法Pearson分析HIF-1α和PHD2 mRNA的表达量之间是否相关;采用Image J检测WB条带的灰度值(蛋白质含量);Graphpad prism7.0作图软件处理实验数据;统计软件SPSS20.0分析实验数据;T检验分析qRT-PCR数据,X~2检验分析免疫组化结果,比较正常及不同病理条件下的子宫内膜组织中PHD2和HIF-1α表达水平之间是否存在差异性及在子宫内膜腺癌组织中的表达水平与影响子宫内膜癌预后的高危因素之间是否有相关性(P<0.05视为有统计学差异)。结果:qRT-PCR实验结果显示:HIF-1α在正常子宫内膜、子宫内膜不典型增生、子宫内膜腺癌组织中,其mRNA表达量分别为0.714±0.652、3.444±1.171、20.830±10.761,HIF-1αmRNA的表达在不典型增生组相比较正常子宫内膜组有所上升(P<0.05),而在内膜癌组织中HIF-1α上升则更加明显(P<0.01);PHD2在正常子宫内膜、子宫内膜不典型增生、子宫内膜腺癌组织中,其mRNA表达量分别为5.936±1.935、2.674±1.625、0.645±0.542,PHD2 mRNA的表达在不典型增生组相比较正常子宫内膜组有所下降(P<0.05),而在内膜癌组织中PHD2下降则更加明显(P<0.01)。Pearson相关性分析显示在mRNA水平,HIF-1α和PHD2的表达量之间存在负相关,r=-0.175,P<0.05(由于|r|<0.3,提示HIF-1α和PHD2负相关性较弱),配对T检验结果提示对于子宫内膜病变程度的预测HIF-1α表达量的检测相对于PHD2更有预测价值(T=4.361,P<0.01)。HIF-1α和PHD2的目的条带分别位于120KDa和46KDa,通过Image J检测WB目的条带的灰度值(蛋白质含量),结果显示:正常子宫内膜、子宫内膜不典型增生、子宫内膜腺癌组织中,HIF-1α蛋白表达量的相对灰度值分别为76.706±27.907、125.436±22.691、153.049±32.425,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);PHD2蛋白表达量的相对灰度值分别为154.159±8.359、113.392±12.266、72.683±18.198,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。Envision二步法结果显示:PHD2阳性表达于细胞浆中,其阳性表达率在正常子宫内膜、子宫内膜不典型增生、子宫内膜腺癌组织中分别为86.7%、70.0%和28.0%;HIF-1α阳性表达于细胞浆和细胞核中,以胞浆为主,均纳入计数,其阳性表达率在正常子宫内膜、子宫内膜不典型增生、子宫内膜腺癌组织中分别为16.7%、40.0%和82.0%,差异均有统计学意义(P<0.05)。qRT-PCR、Western Blot和Immunocytochemistry(Envision二步法)结果显示:HIF-1αmRNA和蛋白的表达在子宫内膜不典型增生组较正常子宫内膜组有所上升,而在子宫内膜腺癌组织中HIF-1α上升则更加明显(P<0.05);PHD2 mRNA和蛋白的表达在子宫内膜不典型增生组较正常子宫内膜组有所下降,而在子宫内膜腺癌组织中PHD2下降的趋势则更加明显(P<0.05)。HIF-1α和PHD2蛋白的表达水平均与子宫内膜癌脉管浸润和术后FIGO分期及淋巴结转移情况具有相关性(P<0.05),而与组织分化程度、肌层浸润深度和肿瘤直径未见相关性(P>0.05)。结论:HIF-1α和PHD2可能参与子宫内膜的病变过程;HIF-1α和PHD2可能促进子宫内膜癌的侵袭和转移;HIF-1α和PHD2 mRNA表达量之间存在负相关性;HIF-1α较PHD2对于子宫内膜癌变更有预测价值。