鸡滑液囊支原体病是一种急慢性传染病,其特点是造成鸡、鸭、鹅与野生鸟类渗出性滑膜囊炎和腱鞘炎。根据中国相关法律法规规定对动物的疾病防治过程中不能随意滥用抗生素。而中草药是天然草药制成的添加剂且它的应用为人们提供了更高质量的畜产品。鉴于鸡滑液囊支原体的风险和中草药应用的重要性,本研究旨在探讨不同中草药对宁夏株鸡滑液囊支原体的影响。为测定相关中草药的抑菌效果,选取12种中药提取物对MS(鸡滑液囊支原体)进行了药敏试验,根据结果选取其中五种(大黄、黄连、金银花、党参、甘草)并组合成中药复方制剂。本实验采用微量稀释法(最小抑菌浓度)用无菌蜗牛试管法和牛津杯法进行验证。结果表明,采用微量稀释法,MS对大黄和黄连的敏感性最高,抑菌范围为15.89～16.98 mg/ml,其次是金银花抑菌范围为25.86 mg/ml,党参和甘草抑菌范围为27.69-33.48 mg/ml。采用牛津杯法时,抑菌圈直径为24 mm用S均值表示,14～24 mm的抑菌直径用I均值表示,14 mm以下的抑菌直径用不敏感或抗性的R表示,得到结果大黄、黄连、金银花、党参、甘草抑菌圈均为S。对选取的五种中药大黄、黄连、金银花、党参、甘草中的主要抑菌成分大黄酚、小柴碱、木犀草素、生物碱与含氮成分、甘草酸进行提取后,采用高效液相色谱法(HPLC)对每种中草药成分进行定量测定。不同来源样品的指纹图谱具有较强的特征性和特异性,10个共有峰的稳定性较好。指纹图谱的平均相似度在0.928～0.983之间,每个样品的非公共峰面积不到总峰面积的10%,达到指纹图谱的要求。为验证中草药提取物按照1:1:1:1:1配伍后的毒性,证明中药复方制剂的安全性,采用急性毒性试验测定小鼠LD50及其可使用范围,为临床安全合理用药提供可靠依据。将48只196 ICR小鼠随机分为6组,每组8只。随机选取一组作为空白对照组,其余5组为实验组。实验组分别按体重注射中药提取物10000mg/kg、20000mg/kg、40000mg/kg、80000mg/kg、160000 mg/kg。根据公式 slog LD50=d 计算标准差 slog LD 50=0.01067,95%可信范围为38990.26mg/kg-42482.05 mg/kg。本实验中,复方中药制剂对小鼠的LD50为41438 mg/kg,远远大于10000 mg/kg,说明复方中药制剂是安全无毒的。为了解鸡滑液囊支原体感染途径,随机将12只6周龄雏鸡分为4组,随机选取一组注射0.5mL的生理盐水作为对照组,另3组分别经呼吸道滴鼻、消化道灌服和皮肤注射的途径每只每天0.5ml细菌液,连续3天。结果表明,呼吸道组在感染后9天、12天、15天、18天经ELISA试剂盒检测血清抗体水平均为阳性。经PCR实验,关节液中检测出现目的片段,并且感染18d后,出现关节肿胀,腿部浮肿,动作缓慢,严重跛行,眼睑肿胀,眼眶流泪,体温波动较大等一系列明显临床症状。对照组、消化道组及皮肤组的ELISA血清抗体检测均为阴性,PCR血清检测未出现目的片段。通过实验可知,在所有感染途径中MS经呼吸道感染的效率最高。选取60只鸡,随机分成6组,编号为1、2、3、4、5、6,其中1组为阴性对照组,2为阳性对照组,通过感染鸡呼吸道进行攻毒试验2、3、4、5、6组,即MS(0.5ml/只)经呼吸道接种3天。感染后7天,第3组给与泰乐菌素和泰妙菌素,4组给以复方中药提纯剂2.0ml治疗,5组给以复方中药提纯剂1.5ml治疗,6组给以复方中药提纯剂1.0ml治疗,各自用药3天。每天测量鸡肛门温度。感染后第13d、15d、19d、22d、25d、28d各采血一次,收集血清后置于-80℃保存备用。6份血清的抗体试验结果表明,添加中草药提取物(2ml/l)的第4组对MS有较好的治疗效果。第13天各组均阳性;第16d和19d,第3组无阳性反应,其余4、5、6组仍有阳性反应;第22d,第3组和第4组出现阴性反应,而第5组和第6组仍有阳性反应。第25d,第3、4、5组,均为阴性,第6组为阴性;第28天各处理组3、4、5、6对MS均呈阴性反应。结果表明,在饮用水中添加大黄、黄连、金银花、党参、甘草等中草药提取物连续给药3天且2mi/日/只可较好治疗MS。因此,大黄、黄连、金银花、党参、甘草提取物具有替代抗生素治疗MS的潜力。为测定鸡的血液生化指标从而进一步说明复方中草药对禽类机体的作用,其中第1组编号A组为对照组,其余4、5、6组为实验组,B组为第4组给与复方中药提纯剂(2.0ml)治疗,C组为第5组给以复方中药提纯剂(1.5ml)治疗,D组为第6组给以复方中药提纯剂(1.0ml)治疗,给药3天,并观察7天。治疗后进行屠宰,同时采集5mL血样。为测定消化率,在每只笼子下方放置托盘收集粪便。收集粪便48小时后,测定养分消化率。结果表明,在饮用水中添加中草药提取物对血糖、胆固醇和红细胞(RBC)有显著的影响(P<0.05),B组和C组鸡血糖和胆固醇显著降低(P<0.05),而C组鸡红细胞(RBC)计数明显改善(P<0.05),白细胞(WBC)、血红蛋白(Hb)和红细胞压积等指标基本保持不变。与对照相比,添加中草药提取物对鸡粗蛋白(CP)消化率有显著影响(P<0.05)即B组粗蛋白消化率和粗脂率显著高于对照组(P<0.05),而其他指标(包括对照组)蛋白质消化率较低(P<0.05)。对照(A)测定粗脂肪(CF)和粗蛋白(CP)的最低消化量。相反,在实验中,所有组由于添加不同的有机化合物,CF的消化率仍未受到影响。由此可知,补充复方中草药提纯物可提高饲粮中粗蛋白的营养消化率.同时改善肠道组织形态学和血清学参数。因此,推荐使用复方中草药作为治疗鸡廉价、高效的促生长剂,不存在抗生素残留等副作用。为观察复方中药提取物对雏鸡免疫器官重量和免疫性能的影响,选取上第七章实验中第1组为空白组,命名一组,第3组西药组命名二组,第4组给药2ml治疗组命名三组,第5组给药1.5ml治疗组命名四组,第6组给药1.0ml治疗组命名五组然后进行免疫学实验,经解剖发现复方中草药组胸腺、脾脏、法氏囊的重量及免疫指标在第3周时均高于抗生素组和对照组,差异有显著性。经7d治疗后MS抗体治疗组高于对照组,差异显著(P<0.05)。这种差异会持续到第21天。结果表明,根据免疫器官各项指数的结果显示,复合中草药治疗后增加了免疫器官重量和免疫指标,对提高鸡的免疫力有至关重要的作用。接上一实验,各组IgG、IgA、IgM和IgY抗体效价的酶联免疫吸附试验结果显示,在中药提取物治疗的第一周,第三组的IgG值最高,其次是第四组、二组、一组、五组。IgA的最高值出现在第四组,其次是第五组、一组、二组、三组,而第四组和第一组的IgM和IgY值分别高于其他组。在中药提取物治疗第4周,第三组的IgG值最高,其次是第二组、四组、五组、一组,IgA的最高值出现在第三组,其次是第二组、四组、五组、一组,与其他组相比,第三组的IgM和IgY值也最高。在上一试验结束时,从每组中随机挑选两只鸡,单独称重并屠宰以进行肠道组织形态学分析。从屠宰的每只鸡中分别采集十二指肠远端、空肠和小肠回肠(无消化物)的样本,并用10%福尔马林溶液固定。结果表明,治疗三组十二指肠绒毛高度、绒毛面积、窝深最大,其次为第二组、四组、五组、一组。同时,治疗组三组空肠和回肠绒毛高度、绒毛面积、窝深最大,其次是二组、四组、五组、一组。