结直肠癌已成为严重影响我国人民健康的常见恶性肿瘤之一，其发病率呈现逐渐增加的趋势。从疾病防治的角度来看，大规模人群结直肠癌筛查无疑具有巨大的社会经济价值，但目前对结直肠癌筛查尚缺乏高敏感性、高特异性、高依从性、低费用的筛查方法。既有的研究表明，应用粪便标本筛查结直肠癌具有较好的临床便利性，而传统粪便潜血试验筛查的敏感性和特异性均低，因此寻找新颖的高敏感性、高特异性的粪便肿瘤标志物以筛查结直肠癌显得甚为必要。已有研究表明肿瘤M2型丙酮酸激酶(tumorM2-PK)和环氧合酶2(COX-2)均是结直肠癌组织中高度表达的肿瘤标志物，但其在粪便中的水平如何，是否可作为粪便标本筛查结直肠癌的肿瘤标志物尚未完全明确；另外，粪便tumorM2-PK、COX-2mRNA筛查效率与传统的粪便潜血试验比较效果如何，以及联合筛查是否具有较高的临床价值均是值得进一步探讨的问题。 第一章粪便肿瘤M2型丙酮酸激酶检测结直肠癌的研究目的：探讨粪便肿瘤M2型丙酮酸激酶(tumorM2-PK)筛查结直肠癌的效率，及其联合潜血试验筛查结直肠癌的临床意义。 方法：连续收集43例结直肠癌病人和43例健康正常人的粪便标本各1份，应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测标本的tumorM2-PK水平，同时行免疫法粪便潜血试验(IFOBT)检测，比较二者单独及联合筛查结直肠癌的效率，并分析tumorM2-PK水平与肿瘤的直径、部位、组织分化程度、Dukes分期等因素的关系。非参数资料及计数资料比较采用两独立样本秩和检验、多个样本秩和检验或x2检验，不同方法检测的敏感性和特异性比较采用受试者工作特征曲线(ReceiverOperatingCharacteristics(ROC)Curves)，所有数据利用SPSS10.0统计软件完成。 结果：粪便tumorM2-PK水平的中位值(最大值，最小值)：结直肠癌组为8.6(0，59.0)U/mL，健康对照组为0.6(0，9.0)U/mL，两组比较差异有显著性意义(U=319，P＜0.01)。 粪便tumorM2-PK检测结直肠癌的ROC曲线下面积为0.827，95％置信区间为(0.736，0.919)，表明粪便tumorM2-PK对检测结直肠癌具有较好的诊断价值。 不同大小、位置、分化程度、Dukes分期的结直肠癌的粪便tumorM2-PK水平无显著性差异(P＞0.05)。粪便tumorM2-PK、IFOBT及二者联合检测结直肠癌的敏感性和特异性分别为65.1％和88.4％、69.7％和81.4％、88.4％和76.7％。tumorM2-PK的筛查敏感性与IFOBT比较差异无统计学意义(x2=0.212，P=0.645)，二者联合检测的敏感性高于IFOBT单独检测的敏感性(x2=4.497，P=0.034)。 结论： 1.粪便tumorM2-PK作为肿瘤标志物对结直肠癌筛查具有较好的临床价值。 2.粪便tumorM2-PK的水平与结直肠癌的位置、分化程度无显著相关，是否与Dukes分期正相关尚需进一步研究。 3.粪便tumorM2-PK、免疫法潜血试验检测结直肠癌具有相近的效率，二者联合可明显提高检测的敏感性。 第二章粪便COX-2mRNA检测结直肠癌的研究目的：探讨粪便COX-2mRNA的筛查结直肠癌的效率，及其联合潜血试验对结直肠癌筛查的临床意义。 方法：连续收集43例结直肠癌病人和39例健康正常人的粪便标本各1份，采用巢式逆转录聚合酶链反应(netRT-PCR)的方法检测粪便中脱落细胞COX-2mRNA的表达水平，比较粪便COX-2mRNA和免疫法粪便潜血试验(IFOBT)单独及联合筛查结直肠癌的效率，并分析COX-2mRNA表达与肿瘤的直径、部位、组织分化程度、Dukes分期等因素的关系。实验数据比较采用两独立样本秩和检验、x2检验或t检验；不同方法检测效率比较采用ROC曲线，所有数据均用SPSS10.0统计软件处理。。 结果：结直肠癌组收获粪便总RNA的中位数为49μg(9～313μg)，对照组收获粪便总RNA的中位数为46μg(6～283μg)，两组比较差异无显著性意义(U=768,P=0.513) 43例结直肠癌粪便中有27例COX-2mRNA表达呈阳性，阳性率62.8％；39例正常对照组中有6例COX-2mRNA表达呈阳性，阳性率15.4％，检出率差异有显著统计学意义(x2=19.112，P＜0.01)。 粪便COX-2mRNA检测结直肠癌的ROC曲线下面积为0.737，95％置信区间为(0.627，0.847)，表明粪便COX-2mRNA对检测结直肠癌具有较好的诊断价值。 直肠癌的COX-2mRNA检测阳性率为82.6％，左半结肠的阳性率为55.6％，右结肠的阳性率27.3％，不同肿瘤部位的粪便COX-2mRNA检测阳性率差异比较有统计学意义(x2=10.255，P=0.006)。而不同肿瘤直径、组织分化程度、肿瘤分期的粪便COX-2mRNA检测阳性率均无显著性差异(P＞0.05)。 粪便COX-2mRNA检测的敏感性与IFOBT比较，差异无统计学意义(x2=0.469，P=0.494)；特异性差异也无统计学意义(x2=0.348，P=0.555)；而COX-2mRNA+IFOBT联合检测的敏感性与IFOBT的比较差异有统计学意义(x2=5.939，P=0.015)，特异性差异比较无统计学意义(x2=1.076，P=0.300)。 结论： 1.COX-2mRNA可作为一种肿瘤标志物在粪便中检出，其对检测结直肠癌具有较好的诊断价值。 2.粪便COX-2mRNA的检出率与结直肠癌位置显著相关，但与结直肠癌的大小、分化程度、Dukes分期无显著关系。粪便COX-2mRNA对直肠癌的检出率高于结肠癌。 3.粪便COX-2mRNA、免疫法潜血试验检测结直肠癌具有相近的效率；单独应用粪便COX-2mRNA检测可能右半结肠癌漏诊机会较大，二者联合可明显提高检测的敏感性。