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本文旨在利用T-RFLP技术研究猪回肠食糜和粪便中微生物多样性,同时结合挥发性脂肪酸的产量和组成,比较不同来源日粮纤维对生长猪小肠和大肠微生物多样性及其代谢的影响。试验主要分为两部分。试验一：T-RFLP技术参数适宜性优化。本试验参照T-RFLP通用技术原理,结合本实验室的现有条件,以生长猪回肠食糜和粪便为样品,从总DNA提取方法、PCR扩增条件、限制性内切酶的选择以及T-RFLP数据分析等环节,优化了适用于猪消化道微生物区系多样性检测的T-RFLP技术流程,为后续试验研究奠定技术基础。结果表明,优化后的CTAB提取法可获得满足T-RFLP检测要求的DNA提取物：优化后的T-RFLP技术可以用于猪肠道微生物多样性及主要微生物种属初步判断,且重复性较好,操作性强。试验二：日粮纤维来源对生长猪肠道微生物多样性及其代谢的影响。本试验按照4 × 4有重复拉丁方设计原理,以装有回肠末端瘘管的生长猪为动物模型,研究了分别以西兰花茎叶粉、小麦麸皮、大豆皮和米糠为单一纤维来源的四种纤维来源日粮对生长猪回肠食糜和粪便微生物群落多样性及挥发性脂肪酸的影响,同时比较了试验期(正饲期第1天和第14天)各日粮回肠食糜和粪便微生物多样性及主要代谢产物的变化动态。结果表明,(1)对于回肠微生物区系的主要微生物组成及多样性,连续饲喂14天后,四种纤维日粮差异不显著(P>0.05)：(2)对于粪便微生物多样性,连续饲喂14天后,大豆皮日粮的微生物多样性指数与米糠日粮差异显著,优势度指数与西兰花日粮和米糠日粮差异显著,均匀度指数与西兰花日粮差异显著(P<0.05)；(3)饲喂初期,四种日粮回肠末端食糜中各VFA含量及比例无显著差异(P>0.05)：饲喂西兰花日粮14天后,回肠食糜丙酸浓度与米糠日粮差异显著(P<0.05)：(4)连续饲喂14天后,大豆皮日粮粪便总VFA、乙酸、丙酸、丁酸含量显著高于其他三组日粮(P<0.05)：西兰花日粮总支链挥发性脂肪酸含量、乙酸与丙酸和与丁酸比最高且与米糠日粮差异显著,乙酸和丙酸比显著高于其他三种日粮(P<0.05)：米糠日粮戊酸含量较低与西兰花日粮及大豆皮日粮差异显著(P<0.05)；(5)试验前期和试验后期相比,西兰花日粮与麦麸日粮回肠香农威纳多样性指数H显著增加(P<0.05),四组日粮粪便香农威纳指数H均显著增加(P<0.05),同时,大豆皮日粮粪便样品均匀度指数Je,米糠日粮粪便样品均匀度指数Je及优势度d指数显著增加(P<0.05),饲喂14天后,西兰花日粮回肠食糜丙酸浓度显著下降(P<0.05),而粪便中各VFA含量及比例与前期相比无显著变化(P>0.05)。