【摘 要】
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异核苷是一类将碱基由糖环的1位移至糖环其它位置而形成的新型核苷类似物.异核苷能抵抗核酸酶的降解,表现出良好的酸、酶稳定性和抗肿瘤、抗病毒活性.G-四聚体是一种通过以阳
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异核苷是一类将碱基由糖环的1位移至糖环其它位置而形成的新型核苷类似物.异核苷能抵抗核酸酶的降解,表现出良好的酸、酶稳定性和抗肿瘤、抗病毒活性.G-四聚体是一种通过以阳离子为模板的鸟嘌呤聚合作用而形成的氢键大环.G-四聚体在体内由DNA和RNA寡核苷酸形成,它广泛存在于染色体端粒酶、基因启动子区域、重组位点及RNA双聚化区域等,对于许多疾病的发生和治疗都有极其重要的意义,如癌症细胞的凋亡、艾滋病的治疗等.近年来的研究发现,作为HIV-Ⅰ前病毒DNA整合入宿主细胞基因组过程中存在着必不可少的第三种酶——整合酶.它被认为是新的合理的抗艾滋药物作用的靶点,引起了研究者们极大的兴趣.该文旨在以抗HIV-Ⅰ整合酶活性良好的寡核苷酸T40214为先导化合物,设计了在不同的位点掺入异鸟苷的寡核苷酸,研究异鸟苷对G-四聚体结构和活性的影响.成功地改进了鸟嘌呤与糖环形成异鸟苷的偶联反应,得到区域选择性的单一产物.简化了异鸟苷单体的合成路线,提高了反应的收率.成功地改进了亚磷酰试剂的合成工艺,解决了亚磷酰化合成异核苷单体的瓶颈问题.通过固相亚磷酰胺法成功地合成了异鸟苷掺入的富G寡核苷酸L1-L10,D3-D6.用MALDI-TOF质谱确认了合成的寡核苷酸的分子量,变性聚丙烯酰胺凝胶毛细管电泳鉴别各寡核苷酸的纯度.圆二色性(CD)光谱研究和毛细管电泳实验表明:1.掺入异鸟苷的寡核苷酸均能形成G-四聚体;2.由于掺入了异鸟苷使得各寡核苷酸形成分子内氢键的能力有着不同程度的影响:L构型的异鸟苷掺入越多,形成的G-四聚体的CD光谱cotton峰强相对正常寡核苷酸越低,毛细管电泳性质越接近正常寡核苷酸;D-构型的异鸟苷掺入多少对G-四聚体的性质影响不大.
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