两种美国扁桃砧木组培快繁的研究

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扁桃(Amygdalus communis L.),又名巴旦杏,俗称美国大杏仁,是蔷薇科、李亚科、桃属、扁桃亚属植物。既是优良的木本油料树种,也是干果树种,具有极高的经济价值。扁桃的繁殖方式主要是嫁接繁殖,因此,选择优良的砧木就极为重要。我国主要是从美国引进扁桃的嫁接树,要大力发展扁桃产业,仅靠引进价格太高,优良的砧木的快速繁殖则可以解决这一问题。桃砧Nemaguard和Lovell是美国生产上主要应用的品种,在甘肃引种后生长良好,适宜在本地种植。本试验以两种砧木嫁接树基部萌发的枝条为外植体,进行了组培快繁的研究,对外植体的采取、初代培养、继代培养、壮苗培养、生根培养和移栽整个过程进行试验研究,初步建立了适于生产扁桃优良砧木的组培快繁过程。 本试验于2003年3月~7月采取嫁接树基部萌发的一年生和当年生枝条,带回实验室清洗消毒,剪成单芽茎段接种到初代培养基中诱导芽萌发。结果表明,Nemaguard以4月取材萌发率最高,而Lovell则是6月取材的萌发率高,分别为67.8%和78.1%。对两种砧木4月采集的外植体消毒时间进行试验得出,酒精的最佳消毒时间Nemaguard和Lovell分别为30秒和20秒,而升汞的消毒时间都为8分钟为最佳。初代培养以MS为基本培养基,扁桃砧木Nemaguard以MS+6-BA0.5mg/L +GA30.2mg/L为最佳诱导培养基,Lovell则以MS+6-BA2.0mg/L+GA30.1mg/L为最佳诱导培养基。其诱导成活率分别为73.3%和80%。继代增殖培养时,选用MS为基本培养基效果优于MS-R、GS和H培养基。细胞分裂素在嫩茎的增殖中起着重要的作用,6-BA增殖效果较KT好,附加1.0mg/L6-BA对两种砧木的增殖效果较好。附加低浓度赤霉素可以提高两种砧木的有效新梢率,浓度太高会减少其增殖倍数,对Nemaguard以0.1mg/L较为适宜,对Lovell来说,赤霉素会明显降低其增殖倍数,不宜于使用。生长素也可以提高增殖效果,生长素中IAA较IBA和NAA效果好,附加0.1mg/LIAA对Lovell的增殖效果较好,而不适于用于Nemaguard。同时本试验使用不同浓度LH和CH对两种砧木增殖效果进行研究,表明LH效果优于CH,以100mg/L浓度较佳。对蔗糖浓度进行试验,结果以3%为最佳。试验结果表明:Nemaguard最适增殖培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L GA3+100mg/L LH;Lovell最适增殖培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L IAA + 100mg/L LH。在27℃左右,2500Lx,24小时光照条件下培养,Nemaguard 40左右继代一次,Lovell 30天左右继代一<WP=7>次,增殖倍数分别为3.05和3.83,有效新梢率分别为67.8%和78.3%。壮苗培养能够促进茎长粗长高,为下一步生根提供壮苗,可进一步提高生根率和移栽成活率。经试验最适壮苗培养基为MS+0.3mg/L 6-BA+0.1mg/L GA3+ 0.1mg/L IAA。 在生根培养阶段,本试验以1/2MS为基本培养基,附加不同生长素以诱导生根,结果表明:在各种生长素不同浓度处理中,以0.5mg/L IBA效果最好,生根率高,且根数多。在诱导生根初期进行黑暗处理能明显提高生根率,其中以暗培养10天处理最好,Nemaguard和Lovell生根率分别达到80%和68.2%。附加0.1%AC对生根有促进作用,而滴加碳素墨水对生根却产生抑制。用100mg/LIBA溶液浸泡嫩茎基部60分钟后,转到无激素的1/2MS培养基中初期暗培养10天,Nemaguard和Lovell的生根率分别达到61.5%和53.3%。将嫩梢先在1/2MS+1.0mg/L培养基中培养6天,再转接到无激素的1/2MS培养基中继续培养,Nemaguard和Lovell的生根率均达到50%。 试管苗移栽时,先在自然光下闭瓶炼苗一周,再开瓶炼苗3天,移栽于大棚沙床上,沙床下铺电热线加温,沙床周围上部用玻璃封闭,注意保温保湿,适时遮光。移栽成活率达80%以上。 对两种砧木不定根发生发育的组织学和细胞学进行研究,两种砧木生根过程中取其茎段基部,进行常规石蜡切片,对生根部位解剖结构进行了观察,结果表明,两种砧木不定根根原基起源于形成层与射线交接处,根的发生与愈伤组织形成没有直接关系。 本试验利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对经过12次继代培养的试管苗与初代材料进行遗传稳定性分析,结果表明,经过离体快繁能够保持两种扁桃砧木的遗传稳定性,可用于扁桃良种砧木的快速繁殖。
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