研究Ⅰ大鼠肺移植后高迁移率族蛋白B1表达的改变目的:观察大鼠肺移植后肺组织高迁移率族蛋白B1（HMGB1）表达和血清HMGB1水平的改变，探讨HMGB1在大鼠肺移植缺血再灌注损伤中的作用。方法:42只SD大鼠随机分为对照组（6只）、移植2h组（12只）、移植6h组（12只）和移植12h组（12只），利用三套管法建立大鼠左肺原位移植模型。在相应的时间点留取静脉血并处死移植后大鼠（对照组取肺冷保存至受体手术完成）保存肺组织标本。使用实时荧光定量逆转录多聚酶链反应检测肺组织HMGB1mRNA水平,使用免疫印迹法和免疫荧光染色分析肺组织HMGB1蛋白水平。血清中HMGB1、TNF-α、IL-1β和IL-6含量采用ELISA法检测，HE染色观察肺组织病理形态变化。结果:大鼠肺移植后2h肺组织HMGB1mRNA表达和HMGB1蛋白含量即见显著升高（P﹤0.01），并随时间延长而增强。大鼠肺移植后各时间点血清HMGB1、TNF-α、IL-1β和IL-6水平均明显升高（P﹤0.01）。结论:大鼠肺移植术后HMGB1表达发生明显改变, HMGB1参与肺移植缺血再灌注损伤过程。研究Ⅱ HMGB1在大鼠移植肺缺血再灌注损伤中的作用目的:观察重组高迁移率族蛋白B1（HMGB1）对小鼠肺的损伤作用及抗HMGB1抗体对大鼠移植肺缺血再灌注损伤的保护作用。方法: BALB/c小鼠随机分为对照组、10μg HMGB1组和100μg HMGB1组，每组各5只，后二组每只分别腹腔注射重组HMGB110μg和100μg。三套管法建立SD大鼠肺移植模型并随机分成单纯移植组、移植加0.1mg抗HMGB1抗体组和移植加1.0mg抗HMGB1抗体组，每组各5只，后二组每只分别腹腔注射抗HMGB1抗体0.1mg和1.0mg。12h后观察各组肺组织的湿干重比、炎症介质（TNF-α、ICAM-1、IL-6）基因表达、病理表现及动脉血气变化。结果:注射重组HMGB1后尤其100μg HMGB1组小鼠PaO2降低，PaCO2、湿干重比升高，TNF-α、ICAM-1、IL-6基因表达增强，肺组织出现病理改变。抗HMGB1抗体处理后，除ICAM-1基因表达未发生明显变化（P＞0.05）外，肺移植大鼠的其它指标均有明显改善，并与抗HMGB1抗体剂量有关。结论: HMGB1在肺移植缺血再灌注损伤中具有重要作用，为肺移植缺血再灌注损伤防治的潜在靶标。研究Ⅲ HMGB1诱导肺泡巨噬细胞释放促炎细胞因子目的:观察高迁移率族蛋白B1（HMGB1）对肺泡巨噬细胞致炎细胞因子释放的影响，并初步探讨其机制。方法:采用NR8383大鼠肺泡巨噬细胞，观察1、10、100、1000μg/L重组HMGB1蛋白对培养上清液中致炎细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6含量的影响，及10mg/LToll样受体4（TLR4）抗体处理对HMGB1诱导致炎细胞因子释放的抑制作用，此外还研究100μg/L重组HMGB1蛋白诱导致炎细胞因子释放随时间的变化。TNF-α、IL-1β和IL-6含量采用酶联免疫吸附试验检测。结果:不同剂量重组HMGB1诱导肺泡巨噬细胞后培养上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6含量均呈剂量依赖性升高；100μg/L HMGB1诱导后肺泡巨噬细胞培养上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6含量的峰值时间不同，分别于诱导6h、12h和24h后含量最高；TLR4抗体处理后TNF-α、IL-1β释放受到部分抑制（P0.05），但对IL-6释放没有显著影响（P﹥0.05）。结论: HMGB1诱导肺泡巨噬细胞释放TNF-α、IL-1β和IL-6，胞膜TLR4可能参与其作用过程。研究Ⅳ肺移植术后血清HMGB1水平的变化及其临床意义目的:探讨血清高迁移率族蛋白B1（HMGB1）水平在肺移植术后的变化和临床意义。方法:肺移植患者21例，其中术后稳定者10例、术后发生急性排斥反应者5例、术后发生肺部感染者6例。采用酶联免疫吸附试验对19名健康者和肺移植患者术前、术后第1、3、7天的血清HMGB1水平进行检测。结果:肺移植术后患者血清HMGB1水平明显升高，急性排斥反应组术后第7天血清HMGB1水平明显高于稳定组（P0.01），肺部感染组术后第3天和术后第7天的血清HMGB1水平均明显高于稳定组和急性排斥反应组。健康对照组血清HMGB1水平明显低于肺移植患者术前水平（P0.01）。结论:肺移植术后血清HMGB1水平升高，血清HMGB1检测对肺移植术后并发症的实验诊断有较好价值。