中国10产地文旦柚果皮化学成分及生物活性研究

来源 :中央民族大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:JK0803_shijiwu
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芸香科(Rutance)柑橘属(Circus)植物柚[Citrus maxima(Burm.)Merr.]的果实是我国传统水果,种植广泛。文旦柚[C.maxima(Burm.)Merr.cv.Wentan]是我国三大栽培柚类品种之一,为福建、浙江、广西等地重要经济作物,其年产量约占我国柚子总产量的49.7%,每年约产生90~120万吨文旦柚皮。而文献调查发现,文旦柚果皮中的次级代谢产物缺乏系统深入研究。在此,本论文通过醇提法制备了我国10个产地文旦柚果皮总黄酮,并通过水蒸气蒸馏法制备了其中的挥发油,首次分别完成了国产文旦柚皮总黄酮和挥发油的系统化学成分及生物活性研究,结果总结如下:10个样品总黄酮得率范围为11.08%~16.12%;比色法测定10个样品总黄酮含量范围为9.84~19.81 mg RT/g DW;采用液质联用技术从10个样品中共检测24个化合物,经质谱数据库检索,文献数据比对,结合核磁共振波谱解析,共鉴定了 21个化合物。其中3个化合物Genipin-β-gentiobioside(CPF12)、Dimethylallyl-methoxycoumarin(CPF22)和橙皮内酯水合物(CPF16)为首次在柚子类植物中发现,7 个化合物 Apigenin-O-(deoxyhexosyl)hexoside(CPF8)、Lucenin-24’-methylether(CPF11)、Hydroxy-methoxy(iso)flavone-O-hexoside(CPF10)、橙皮内酯水合物(CPF16)、Genipin-β-gentiobioside(CPF12)、Dimethylallyl-methoxycoumarin(CPF22)和Diosmetin-7-O-rutinoside(CPF23)为首次在文旦柚中发现;10个样品的共有化合物分别是,绿原酸(CPF6)、芦丁(CPF7)、柚皮苷(CPF13)、橙皮苷(CPF14)、新橙皮苷(CPF15)和橙皮内酯水合物(CPF16)。进一步测定了 10个样品中芦丁(0.08~1.23 mg NA/g DW)、柚皮苷(0.17~2.45 mg NA/g DW)、橙皮苷(0.11~2.22 mg HE/g DW)、新橙皮苷(0.05~0.60 mg NA/g DW)和橙皮内酯水合物(3~4.5 mg MH/g DW)的相对含量。采用DPPH、ABTS和FRAP实验测定了 10个样品抗氧化活性。福建莆田样品WF1和浙江台州样品WF7显示了综合抗氧化能力。其中,DPPH自由基清除能力WF1的SC50值为1.01 mg/mL,WF7的SC50 值为 0.59 mg/mL;ABTS 抗氧化能力 WF1 为 67.65 μmol TE/g,WF7 为 60.62 μmol TE/g;亚铁离子还原能力 WF1 为 95.10 μmol Fe2+/g,WF7 为 97.06 μmol Fe2+/g。最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)实验中,莆田样品 WF1(MIC=31.25~125 μg/mL)、漳州样品 WF2(MIC=125~500μg/mL)、南平样品 WF4(MIC=125~500μg/mL)和浙江台州样品WF7(MIC=31.25~125μg/mL)表现出较好抑菌活性;细胞毒活性实验中,莆田样品WF1(IC50=44.25~72.68μg/mL)、漳州样品 WF2(IC50=84.61~97.35μg/mL)和台州样品 WF7(IC50=43.39~75.278 μg/mL)对人体宫颈癌、人体乳腺癌和人体肝癌细胞表现出较好的抑制活性;α-葡萄糖苷酶抑制活性实验中,莆田样品(WF1)、漳州样品(WF2)和南平样品(WF4)表现了酶抑制活性,其 IC50 值分别为 4.67 mg/mL、7.99 mg/mL 和 6.44 mg/mL;通过主成分分析发现5个代表化合物与总黄酮生物活性之间具有一定相关性。10个样品挥发油得率范围为0.69%~1.45%。通过气质联用技术,从10个样品中共检测出54个化合物,检出率95.48%~98.49%,其中共有化合物38个。含量相对较高的化合物是β-月桂烯(CP4,19.16%~27.95%)、d-柠檬烯(CP8,51.06%~57.77%)和诺卡酮(CP52,2.82%~6.16%)。基于样品化学成分,通过主成分分析和聚类分析,将福建莆田(WE1)和浙江台州(WE7)样品分为第一簇,福建南平(WE4)、广东梅州(WE10)、江西赣州(WE5)、广西玉林(WE9)、福建泉州(WE3)和福建漳州(WE2)样品分为第二簇,浙江嘉兴(WE8)和江苏徐州(WE6)样品为第三簇。福建莆田(SC50=4.72 mg/mL)和浙江台州(SC50=5.67 mg/mL)样品表现了 DPPH自由基清除能力;最小抑菌活性实验中,莆田(WE1)台州和(WE7)的样品表现出良好抑制活性,其MIC值均小于625 μg/mL,其他样品MIC值范围为625~2500 μg/mL;细胞毒活性实验结果显示,莆田(WE1,IC50=37.45μg/mL)、漳州(WE2,IC50=87.55μg/mL)、赣州(WE5 IC50=92.71μg/mL)和台州(WE7,IC50=20.69 μg/mL)的样品对人体肝癌细胞表现出较好抑制活性,上述四个样品对人体宫颈癌细胞也具有抑制活性,其IC50值分别为 43.13μg/mL、99.76μg/mL、85.69 μg/mL 和 66.24μg/mL。论文的实验结果显示了文旦柚果皮中的黄酮和挥发油均有良好生物活性,具有开发为天然抗氧化剂、抗菌剂以及保健类食品的潜力。本论文的研究结果为我国沿海地区重要经济作物—文旦柚的果皮在食品工业中作为香料、天然抗氧化剂、抗菌剂和功能性食品等方面的进一步开发利用提供了系统详细数据支持,为实现我国天然植物资源的最大化利用奠定了科学基础。
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