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该实验内容是该项目的一部分,主要研究了从鸡的肠道中分离筛选出五种肠道菌,初步鉴定为肠道益生菌,在此基础上对各菌株的发酵特性进行探讨,并对各菌株拮抗致病菌和抗生素进行了探讨.同时也探讨了筛选出的菌株间的拮抗性及相容性.选用BS培养基,从15天龄小鸡的盲肠中分离筛选出双歧杆菌.选用SL培养基,从10天龄小鸡的小肠中分离筛选出乳酸杆菌.选用EC培养基,从30天龄小鸡的盲肠中分离筛选出屎肠球菌.选用BLI培养基,从30天龄小鸡的盲肠中分离筛选出地衣芽孢杆菌.选用麦牙汁培养基,从成年鸡的盲肠中分离筛选出酵母菌.对分离筛选获得的五种菌株进行初步鉴定:菌株B171是双歧杆菌,菌株M16是嗜酸乳杆菌,菌株W019是屎肠球菌,菌株YB02是地衣芽孢杆菌,菌株BT21是酵母菌.双歧杆菌B171为革兰氏阳性严格厌氧菌,最佳培养条件是初始pH值7.0,最适培养温度为40℃.采用正交实验方法,确定最佳培养基配方为酵母膏0.9﹪,胰蛋白胨0.65,大豆蛋白胨0.6﹪,葡萄糖2.5﹪,双歧因子0.2﹪,生长因子10﹪.发酵培养时期18h.在最佳培养条件下,B171的增殖菌数可达6.2×10<8>个/mL.嗜酸乳杆菌M16为革兰氏阳性兼性厌氧菌,发酵培养时期16h,增殖菌数可达7.1×10<8>个/mL.屎肠球菌W019为革兰氏阳性兼性厌氧菌,发酵培养时期16h,增殖菌数可达8.3×10<8>个/mL.地衣芽孢杆菌YB02为革兰氏阳性好氧菌,其最佳培养条件为初始pH值6.5,最适培养温度30~32℃.采用正交实验方法,确定最优培养基为酵母膏1.5﹪,玉米淀粉2.0﹪,NaH<,2>PO<,4>+Na<,2>HPO<,4>0.2﹪+0.2﹪,玉米浆2.0﹪.发酵培养时间18~20h,此时增殖菌数可达3.5×10<9>个/mL.酵母菌BI21的发酵培养时间为18~20h,此时增殖菌数可达1.24×10<8>个/mL.拮抗抗生素实验表明,双岐杆菌B171对丁胺卡那霉素、新霉素、巴龙霉素有耐药性,对青霉素、万古霉素、林可霉素和杆菌肽敏感.乳酸杆菌M16对丁胺卡那霉素、新霉素、环丙沙星有耐药性,对林可霉素、庆大霉素敏感、屎肠球菌W019对林可霉素、丁胺卡那霉素有耐药性,对庆大霉素、万古霉素、氨卞青霉素敏感.地衣芽孢杆菌YB02对林可霉素、磺胺嘧啶有耐药性,对庆大霉素、丁胺卡那霉素、环丙沙星、氨卞青霉素、新霉素敏感.酵母菌BI21对环丙沙星、林可霉素、新霉素、杆菌肽有耐药性.双歧杆菌B171、嗜酸乳杆菌M16、屎肠球菌W019、地衣芽孢杆菌YB02、酵母菌BI21之间相互没有拮抗作用.