【摘 要】
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大量研究已表明,氧化应激能够引起多种睾丸相关疾病,这严重危害着人类和动物的生殖健康。氧化应激在人类的辅助生殖领域中,不仅可以造成体外胚胎的凋亡、老化,而且还可以造成精子或者卵子的细胞氧化损伤,从而使发育受阻以至于造成不孕不育等疾病。目前,就我们所了解的造成人类和动物生殖能力下降的主要原因之一就是大量多不饱和脂肪酸存在于精子和卵子细胞膜中,从而引起ROS的攻击所造成的。因此,建立相关的氧化应激模型对
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大量研究已表明,氧化应激能够引起多种睾丸相关疾病,这严重危害着人类和动物的生殖健康。氧化应激在人类的辅助生殖领域中,不仅可以造成体外胚胎的凋亡、老化,而且还可以造成精子或者卵子的细胞氧化损伤,从而使发育受阻以至于造成不孕不育等疾病。目前,就我们所了解的造成人类和动物生殖能力下降的主要原因之一就是大量多不饱和脂肪酸存在于精子和卵子细胞膜中,从而引起ROS的攻击所造成的。因此,建立相关的氧化应激模型对该方面的研究有十分重要的意义。本实验就是对小鼠进行腹腔注射3-NPA,从而达到小鼠睾丸氧化应激模型的建立。实验随机的将选取的20只昆明雄性小鼠分成正常对照组与3-NPA注射组。3-NPA组中设立3个浓度梯度分别为低浓度组(6.25mg/kg)、中浓度组(12.5mg/kg)、高浓度组(25mg/kg)。模型组用3-NPA腹腔注射各浓度计量,模型组注射生理盐水早晚两次,中间间隔12h,共注射7d,于最后1次腹腔注射后对小鼠进行公母合笼,等候观察并记录其见栓率,后继续跟进记录其产子数。最后1次腹腔注射12h后处死各组小鼠,对小鼠睾丸、精囊腺、胸腺、脾脏等器官指数和小鼠睾丸与附睾的睾丸指数进行测定,之后对附睾进行尾部取精处理,用清华同方动物精子全自动分析仪分析精子密度、活率、直线速度等指标。对睾丸组织丙二醛(MDA)浓度以及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性进行检测。结果表明,3-NPA的注射使小鼠的见栓率与平均产子数显著降低;对增重指数、胸腺指数及脾脏指数无显著性影响。而精囊腺指数与睾丸指数显著降低;与对照组相比,精子密度与精子活率也显著降低,其他精子运动均无显著变化;同时,MDA含量和抗氧化酶GSH-Px、SOD以及CAT活性均显著上升;通过睾丸切片,我们还发现随着3-NPA浓度的上升,各级生精细胞之间的间隙逐渐增大,其排列也更加的混乱。综上所述,3-NPA可成功诱导建立小鼠睾丸氧化应激模型。且其诱导氧化应激模型的最适浓度为 12.5mg/kg。
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