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结球甘蓝(Brassica oleracea var.capitata)简称甘蓝,属于十字花科芸薹属,原产于地中海沿岸,是世界上广泛种植的一种重要蔬菜作物.病毒病是甘蓝的一种重要病害.TuMV(Turnip Mosaic Virus)是甘蓝病毒病的主要毒原,主要靠蚜虫以非持续性方式传播.采用化学药剂防治病毒病效果不明显,培育抗病品种是一种有效的防治途径.传统育种在抗病性转育的过程中,需要人工接种后,根据表型用目测法进行抗病性鉴定,存在费时费力、转育效率低、因鉴定的误差有时容易使目标性状丢失等问题.分子标记辅助选择(Marker-Assisted Selection, MAS)为在植物抗病育种中目标性状的选择提供了一条快速有效的途径.AFLP标记因其具有多态性高、重复性好等优点,在目标基因标记方面显示出广泛的应用前景.该研究以中国农业科学院蔬菜花卉研究所育成的甘蓝感病自交系01-16-5-7和抗病自交系20-2-5及其配制的F<,1>代自交后构建的F<,2>代分离群体为试材.用侵染中国甘蓝的TuMV主导致病株系——TuMV-C<,4>对亲本和F<,2>的各个单株进行室内人工接种,利用酶联免疫吸附测定法对各植株TuMV的抗性进行鉴定.根据鉴定结果采用BSA法选取不同F<,2>单株构建两对抗感池,应用AFLP分子标记技术筛选与甘蓝抗TuMV基因连锁的分子标记,在分子水平上为甘蓝抗TuMV辅助育种提供一种快速有效的方法.主要结果如下:(1)在温室隔离条件下进行苗期人工接种TuMV-C<,4>株系,经过酶联免疫吸附检测,F<,2>代分离群体中抗病单株和感病单株的比例为3.10:1,对检测结果进行x<2>适合性检验,xc<2>=0.053<=3.84,证明其符合3:1的孟德尔遗传分离规律,表明该群体中对TuMV的抗性受显性单基因控制.(2)通过BSA法,从F<,2>代分离群体中选用极端抗病和极端感病的不同单株构建两对抗感池.应用AFLP技术,对与甘蓝抗TuMV基因连锁的AFLP标记进行了筛选,以8个EcoRI引物,16个MseI引物,组成128个引物组合对抗感池进行筛选,筛选出E<,24>M<,61>引物组合在两对抗感池中均出现一条相同差异带,其片断大小为530bp,暂将该标记命名为E<,24>M<,61>-530.(3)用E<,24>M<,61>引物组合对亲本、建池单株和其他的F<,2>单株进一步检测,并重复三次,结果稳定.在所检测的172个F<,2>群体单株中,只有23株发生交换,表明筛选到的AFLP标记E<,24>M<,61>-530与甘蓝抗TuMV基因连锁.经最大似然函数计算,Kosambi函数校正,其遗传距离为14.44cM.