论文部分内容阅读
现已证实，多种癌基因或抑癌基因共同参与导致了肺癌的发生、发展，这些基因均定位于染色体的不同位点。分析肺癌染色体畸变规律，有助于发现肺癌新的相关基因位点，筛选出新基因。由于种种原因，目前国内尚未见肺癌染色体畸变的系统性研究。本研究采用传统的细胞遗传学方法、比较基因组杂交（CGH）、光谱核型分析技术（SKY）分析了肺癌染色体异常变化情况，并对其与病理类型、多药耐药和临床生存期的关系进行了探讨。主要结果如下： 1．32％的肺癌患者的外周血有染色体畸变，表现为数目和结构异常。Ⅰ、Ⅱ期肺癌畸变发生率为10.7％，中晚期则为59.1％，两者间有明显差别（p＜0.05）。 2．肺癌组织存在着较多的染色体异常，在各类型肺癌中共同的变化有3p、11p、17p、13q的缺失和1q、3q、8q、5p的扩增。非小细胞癌常见表现为1p、8p、6q、13q缺失，5p、1q、8q和11q扩增；鳞状细胞癌常有2q36-37缺失及3q、12p扩增，而腺癌表现为1q扩增和9q22缺失。小细胞癌则表现为3p、5q、10q、17p缺失，3q、5p、19扩增。非典型类癌则未见明显染色体扩增，但有11q缺失。与G显带技术相比较，CGH技术发现了更多的染色体畸变，特别是亚区亚带的变化。 3．采用大剂量间歇冲击法建立的人肺腺细胞株，除能量代谢降低外，其它特性与亲代细胞相似。 4．肺腺癌细胞株A549、A549/CDDP、SPC-A-1及SPC-A-1/CDDP的染色体核型均为亚三倍体，癌细胞在诱导耐药后出现了较多的染色体断裂和重组。与亲代细胞相比较，耐药细胞株A549/CDDP细胞出现了4q、11q23-pter扩增，2p14-pter、2q23-q23,7p缺失；SPC-A-1/CDDP细胞新发现有6q、11q23-qter扩增，2p14-pter、2q23-q24、7p缺失。 5．SKY分析发现有几条染色体发生了易位；并确认了G显带分析时不能确认的几条染色体，它们都是染色体断裂后重排形成的衍生染色体。与亲代细胞相比较，两株耐药细胞均出现数条衍生染色体，并有一条相同的 der（ZI）t（ZI；22）染色体。 6．肺癌手术后高生存期的病人外周血淋巴细胞培养染色体分析显示，染色体畸变发生率为3，27％，明显低于非手术肺癌病人的10．85％ （p＜0刀00）。 7．15例高生存期的病人肺癌标本中，有4例未见任何染色体畸变发生；有11例存在染色体畸变，但涉及的染色体数目较少。同一部位有两例或两例以上发生变化的染色体有，鳞癌的3q、lq扩增，Zq缺失；腺癌的lq扩增，gq缺失、小细胞癌的3q和SP扩增。 本研究结论： 1．引进和建立了CGH、SKY多彩色荧光原位杂交技术，并成功地运用于肺癌染色体畸变的研究。 2．肺癌患者外周血染色体畸变率明显高于良性病变者，并与临床分期密切相关。 3．肺癌患者畸变呈多样、复杂性，与病理类型有关。备类型肺癌共同的变化有3p、lip、17p、13q的缺失和lq、3q、sq、sp的扩增。鳞状细胞癌特殊表现为2q36I7缺失及3q、12p扩增，而腺癌表现为lq扩增和9q22缺失。小细胞癌则表现为3p、sq、10q、17p缺失，3q、sp、19扩增。非典型类癌则未见明显染色体扩增，但有11q缺失。 3．成功建立肺腺癌多药耐药细胞株，其生长特性稳定。A549儿DDP细胞耐药可能与 4q、11 q23－ptCf扩增，Zpl4－ptCf、2q23－q24、7p缺失相关。SPC－A－l／CDDP细胞耐药贝可能与 6q、11q23－pier扩增，Zpl4·pier、2q23－q24、7p缺失有关。在这些位点上可能存在着新的MDR相关基因。 5．染色体重排可能在肺腺癌细胞获得性耐药中起重要作用。 6．染色体畸变少的肺癌患者预后好、生存期长。