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目的:探讨反义寡核苷酸（Antisense Oligodeoxynucleotide,ASODN）对人胆管癌QBC939细胞株X连锁凋亡抑制蛋白（X-chromosome-linked inhibitor of apoptosis,XIAP）基因的抑制作用及对癌细胞增殖及凋亡的影响;观察XIAP反义寡核苷酸抑制XIAP基因后胆管癌细胞对化疗药物氟尿嘧啶（5-FU）敏感性的影响。方法:应用脂质体LipofectamineTM 2000将ASODN瞬时转染入QBC939细胞中,荧光显微镜观察不同时间段内ASODN转染入细胞的情况,并计算转染率;实验分4组:ASODN组（反义组）、NSODN组（错义组）、Liposome组（脂质体组）、Control组（空白对照组）,采用RT-PCR检测各组XIAP mRNA表达的变化;四甲基偶氮唑蓝（简称MTT）法检测不同浓度的ASODN对细胞生长增殖的抑制作用;流式细胞仪检测转染前后细胞周期的变化和凋亡率。参考相关文献报道设计5-FU浓度分别为4、8、16、32、64、128、256、512、1024μg/ml,MTT法检测以上不同浓度的5-FU对QBC939细胞的生长抑制作用,计算半数抑制浓度(IC50),根据筛选出的最佳ASODN浓度、作用时间及5-FU IC50,设计实验分组:ASODN组、5-FU组+ASODN组（简称5-FA组）、5-FU组、Control组,MTT法检测ASODN联合5-FU对QBC939细胞的抑制率,流式细胞仪检测单独转染与联合转染凋亡率的变化。结果:采用瞬时转染技术能成功将ASODN转染入QBC939细胞中,并能获得较高的转染效率,在一定浓度范围内呈现剂量时间依赖性,当ASODN浓度为1.11μmol/L,24h可达最高的转染效率,为95.9±2.0%;RT-PCR结果显示ASODN组的XIAP mRNA表达水平可明显降低,与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05）;MTT结果表明5种浓度的反义寡核苷酸均可抑制QBC939细胞的增殖,在0.28-1.11μmol/L之间对细胞的抑制作用呈时间和剂量依赖性;ASODN组在不同浓度和时间对QBC939细胞的抑制率均明显高于NSODN组和脂质体组,差异有统计学意义（P＜0.05）;流式细胞术表明ASODN组QBC939细胞出现了代表凋亡的亚G1峰（10.67±2.25%）,且G0/G1期细胞（58.47±1.90%）均高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;通过MTT法测得5-FU半数抑制浓度为550.22±19.10μg/ml,且5-FU+ASODN组QBC939细胞的48h抑制率为71.64±0.64%,明显高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;流式的结果进一步表明联合转染细胞的凋亡率（62.16±1.18%）较对照组明显增加,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:瞬时转染ASODN能有效下调QBC939细胞XIAP基因表达,通过封闭XIAP基因关键区域能有效抑制胆管癌细胞的增殖并诱导凋亡;同时抑制XIAP基因的表达能显著提高胆管癌细胞对化疗药物5-FU敏感性,可能为胆管癌基因治疗提供新途径。