鸡精液冷冻稀释液筛选和冷冻程序的研究

来源 :甘肃农业大学 | 被引量 : 8次 | 上传用户:huahuaaixue
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本论文从冷冻稀释液的筛选、优化和冷冻程序几个方面对鸡精液冷冻技术进行了研究。对于稀释液的筛选,本文先设计了8个冷冻稀释液基础液,分别进行大量的冷冻试验,最终筛选出一个冷冻效果较好的稀释液基础液,然后再对该基础液从渗透压,抗冻剂种类及添加浓度,卵黄、咖啡因和维生素E等物质的添加等方面进行了较为系统的优化,得到了一个冷冻效果较好的稀释液。然后又对影响精液冷冻效果的另一个因素——冷冻工艺从降温速度,平衡时间和冷冻剂型等方面进行了研究,确定了一个较为合理的冷冻程序。具体的试验结果如下:1.渗透压为422mOsm,pH为6.48的1号稀释液基础液冷冻效果最好,精子冻后活力达到0.72,精子复苏率达90.0%,存活时间达60min,极显著地高于其它液体。2.渗透压为420mOsm时精子的冻后活力、复苏率和存活时间分别为0.70、87.5%和75min,均极显著地高于渗透压为330mOsm、360mOsm、390mOsm、400mOsm、440mOsm时的冻后活力和复苏率(p<0.01)。3.鸡精液冷冻时的最佳抗冻剂为浓度为6%的甘油,其次为浓度为6%的DMSO,最后为浓度为10%的DMA和浓度为4%的乙二醇。联合抗冻剂冷冻效果与单一抗冻剂差异不显著。4.添加10%的卵黄、5mmol/L的咖啡因和15mg/mL的维生素E可显著地提高精子的冻后活力和复苏率。5.在鸡精液冷冻时,降温速度控制在0.55℃/min,在4℃下平衡120min冷冻效果较好。6.冷冻剂型以颗粒冻精为好。7.鸡冷冻精液的解冻以干解冻效果较好,一次解冻的精液颗粒数应尽可能少。8.高温解冻的解冻效果优于温水解冻(30℃~40℃)和低温冰水解冻(0℃~5℃),本试验中采用70℃高温解冻效果较好。9.采用离心去除甘油时,离心速度应控制在800rpm为宜。
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