论文部分内容阅读
在我国,杜仲具有很丰富的资源优势,但其资源综合利用率较低,大部分原料处于自生自灭状态,造成了其食用价值和药用价值极大浪费。本论文以我国特色植物资源杜仲为研究对象,以获得目的组分松脂醇二葡萄糖苷和杜仲多糖为研究目标,提出了植物资源的多级化高效利用理念,其涵盖内容如下：采用离子液体-超声辅助提取技术对杜仲皮中松脂醇二葡萄糖苷进行提取,采用响应面法对提取工艺进行优化,采用大孔树脂法对杜仲皮离子液体提取液中松脂醇二葡萄糖苷进行富集纯化；采用超声辅助提取技术对杜仲多糖进行提取,对杜仲多糖体外抗氧化进行了研究。本文系统地研究了杜仲皮中的松脂醇二葡萄糖苷和杜仲多糖高效提取分离的工艺,以及松脂醇二葡萄糖苷纯化方法、杜仲多糖理化性质的研究,其主要内容如下：(1)建立了高效液相色谱(HPLC)法检测松脂醇二葡萄糖苷的方法,色谱条件：检测波长为：228nm；流动相组成及比例：乙腈：0.4%磷酸=20：80；色谱柱：Kromasil C18(5μm,4.6mm×250mm);流速：1.0mL/min；进样量5μ.L；柱温：室温；等度洗脱45min。建立了最佳提取杜仲皮松脂醇二葡萄糖苷的工艺,采用响应面法对其提取工艺条件进行了优化。考察了离子液体种类、离子液体溶液浓度、浸泡时间、超声功率、超声时间和液料比等因素对松脂醇二葡萄糖苷得率的影响。研究结果表明,以浓度为1.0mol/L的[Bzmim]Br离子液体为最佳提取溶剂,浸泡时间为3h。在此基础上,采用Design Expert7.0统计分析软件的三因素三水平的响应面分析法进行提取工艺的优化,得到最佳提取工艺条件：超声功率200W、超声时间40mmin、液料比14：1。松脂醇二葡萄糖苷的实际得率可达3.12mg/g。(2)采用大孔树脂法对杜仲[Bzmim]Br离子液体提取液中松脂醇二葡萄糖苷富集纯化。通过考察HPD100A、HPD700、HPD400、HPD750、HPD850、HPD600和HPD826大孔树脂对杜仲皮离子液体提取液中松脂醇二葡萄糖苷纯度的影响,筛选出用HPD850型树脂为最佳纯化松脂醇二葡萄糖苷的材料。通过对分离工艺的研究,得出最佳分离工艺条件为：吸附温度为25℃,饱和吸附时间4h,选用松脂醇二葡萄糖苷浓度为9.66mg/L的杜仲[Bzmim]Br离子液体提取液为纯化样品,其对松脂醇二葡萄糖苷的饱和吸附量为15.65mg/g；洗脱剂为20%的乙醇溶液,解吸时间90min,解吸温度25℃,解吸液中松脂醇二葡萄糖苷含量为14.7mg/g,浓缩至干,浸膏中松脂醇二葡萄糖苷纯度为45.8%。(3)确定了采用超声强化溶剂提取法从杜仲皮中提取杜仲多糖的方法,对提取工艺进行了优化。考察了浸泡时间、超声时间、超声功率、超声温度和液料比等因素对杜仲多糖得率的影响,以杜仲多糖得率为指标,得到最佳提取工艺条件为：浸泡时间2h,超声时间：30mmin,超声温度40℃C,超声功率：250W,液料比12：1。杜仲多糖得率为1.9%。(4)对制备的杜仲皮多糖的体外抗氧化能力研究采用多指标进行考察。对杜仲多糖的抗氧化活性分析评价结果表明,在相同浓度下,杜仲多糖对DPPH自由基的清除能力明显高于维生素C；杜仲多糖的铁还原能力低于维生素C的铁还原能力,并且杜仲多糖的铁还原能力与其浓度呈正相关。