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目的本研究探讨尼古丁(nicotine,NIC)诱导EGFR敏感突变PC-9肺癌细胞株吉非替尼耐药及二甲双胍对其作用。方法PC-9分成不同组,空白组,尼古丁组,二甲双胍组,二甲双胍和尼古丁组,SB431542组,SB431542和尼古丁组。利用实时荧光定量PCR检测E-cadherin和Vimentin RNA表达,Western blot检测E-cadherin和Vimentin蛋白表达,p-Smad2,Smad2蛋白。CCK-8检测不同分组细胞对吉非替尼药物敏感情况。Transwell小室实验检测细胞侵袭迁移。结果尼古丁诱导PC-9细胞上皮间质转化呈时间浓度依赖,在10μmol/L尼古丁处理72h后,发生E-cadherin的下调和Vimentin的上调最明显,故选该条件做以下实验。CCK-8提示,相比空白组,尼古丁组PC-9细胞对吉非替尼敏感性减弱,在吉非替尼浓度为0.05μmol/L最明显(P=0.000)。Matrigel侵袭实验提示尼古丁组穿膜细胞数较空白组明显增多[(15.7±1.53)个/高倍视野vs.(32.7±2.08)个/高倍视野,F=75.406,P=0.000,P=0.000];迁移实验的结果与之相似。与空白组相比,尼古丁组E-cadherin mRNA表达水平明显降低[(0.932±0.100)vs.(0.459±0.024),F=25.924,P=0.000,P=0.000)],Vimentin mRNA表达水平明显升高[(1.200±0.200)vs.(1.973±0.129),F=20.998,P=0.000,P=0.000]。蛋白水平变化与之相同。二甲双胍+尼古丁组相比于尼古丁组,p-Smad2蛋白表达降低,SB431542组+尼古丁组改变同上。二甲双胍+尼古丁组可以增加尼古丁作用PC-9对吉非替尼的敏感性,在吉非替尼浓度为0.05μmol/L,0.1μmol/L,0.5μmol/L,1μmol/L,5μmol/L时有统计学意义,SB431542+尼古丁组同上。二甲双胍+尼古丁组可以减弱尼古丁组的穿膜数[(17.0±2.00)个/高倍视野vs.32.7±2.08)个/高倍视野,F=75.406,P=0.000,P=0.000],迁移实验呈现相同的结果,SB431542+尼古丁组相比尼古丁组细胞穿模数减少(P<0.05)。相比于尼古丁组,二甲双胍+尼古丁组上调E-cadherin mRNA[(0.459±0.024)vs.(0.838±0.058),F=25.924,P=0.000,P=0.000)],下调Vimentin mRNA[(1.973±0.129)vs.(1.467±0.115),F=20.998,P=0.000,P=0.003)],SB431542+尼古丁组上调E-cadherin mRNA,下调Vimentin mRNA,相比于尼古丁组(P<0.05)。结论尼古丁通过上皮间质转化诱导PC-9细胞吉非替尼耐药,二甲双胍和SB431542可以逆转上述现象。