冠突散囊菌接种发酵茯砖茶的初步研究及其安全性评价

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本课题采用正交试验研究了冠突散囊菌液体发酵培养基配方及其发酵条件。并将纯培养的冠突散囊菌菌液接种于黑毛茶进行茯砖茶发酵,设立茶叶浸出液和空白对照组进行对比。使用大鼠作为材料,对冠突散囊菌及其接种发酵而成的茯砖茶进行了急性毒性试验和30d喂养试验。结果显示,在CZG、PDA和査氏三种液体培养基中,液体CZG培养基为最佳培养基。正交试验结果显示液体CZG培养基最佳配方为:NaCl32g、NH4NO33g、蔗糖20g、MgSO40.5g、K2HPO41g、水1000ml。冠突散囊菌最佳液体培养条件为:pH5.8、温度30℃、转速180 r/min。茯砖茶发酵结果显示空白对照组发酵第12天茶砖上孢子数为1.13×1031.25×103个/g干茶,发酵第15天茶砖上孢子数为1.77×1031.69×103个/g干茶,发酵第21天茶砖上孢子数为1.93×1032.09×103个/g干茶;茶叶浸出液组发酵第12天茶砖上孢子数为1.09×1044.64×104个/g干茶,发酵第15天茶砖上孢子数为1.85×1055.82×105个/g干茶,发酵第21天茶砖上孢子数为2.93×1057.28×105个/g干茶;菌液组发酵第12天茶砖上孢子数为4.73×1051.75×106个/g干茶,发酵第15天茶砖上孢子数为1.13×1067.32×106个/g干茶,发酵第21天茶砖上孢子数为3.13×10617.10×107个/g干茶。冠突散囊菌急性毒理学试验结果为:冠突散囊菌最大耐受剂量>7.31×1010个/ml。30d喂养试验结果显示,使用冠突散囊菌各剂量组菌液对大鼠进行经口灌胃在体重、血液学指标、脏器系数及一般行为方面均无显著性影响(P﹥0.05),判断冠突散囊菌为实际无毒物。冠突散囊菌接种发酵而成的茯砖茶急性毒理学试验结果为:茯砖茶LD50>5001mg/kg。30d喂养试验结果显示,使用茯砖茶各剂量组茶叶浸出液对大鼠进行经口灌胃在体重、血液学指标、脏器系数及一般行为方面均无显著性影响(P﹥0.05),判断冠突散囊菌接种发酵而成的茯砖茶为实际无毒物。上述结果表明冠突散囊菌在液体培养基及黑毛茶上均能良好生长、产生大量闭囊孢子。接种茶叶浸出液与纯菌液均能不同程度提高“金花”数量,且使用纯菌液进行接种发酵茯砖茶与传统发酵工艺相比,可大幅度提高“金花”产量、有望使发酵过程提前进入干燥期,从而缩短发酵周期。且冠突散囊菌及其发酵而成的茯砖茶经毒理学实验证实均为实际无毒物,可安全食用。
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