本文主要从以下几个方面展开: 1．钙调神经磷酸酶活性的电化学方法检测 钙调神经磷酸酶能够催化对硝基苯磷酸去磷酸化生成对硝基苯酚，对硝基苯酚在热解石墨电极上有良好的直接电化学响应，而反应体系中的其它物质不干扰对其进行电化学检测，为用电化学方法检测钙调神经磷酸酶的活性提供了可能。作者进一步研究了多种蛋白质电化学中常用的膜材料对钙调神经磷酸酶活性的影响，发现疏水、较低的荷电的膜环境有利于钙调神经磷酸酶保持酶的活性，其中Triton X-100对保持该酶的活性效果最好，反映在氧化峰电流上最大，同时稳定性也较好。基于以上研究结果，作者建立了一种用差分脉冲伏安技术检测钙调神经磷酸酶活性的方法，为用电化学方法深入研究酶的活性调节打下了基础。 2．钙调神经磷酸酶活性调节的电化学研究 用差分脉冲伏安技术研究了Ni2+对钙调神经磷酸酶的激活情况，发现1.0mM的Ni2+使酶的活性达到最大，更高的Ni2+浓度则表现出对酶活性的抑制，这与光谱方法研究的结果相一致。钙调神经磷酸酶的催化动力学分析显示，未被激活的酶对底物(对硝基苯磷酸)亲和力较低。同时，研究发现，Zn2+虽然是钙调神经磷酸酶催化中心的双核金属离子之一，但是生理浓度下的Zn2+几乎完全抑制了该酶的活性。此外，研究表明，ATP在生理浓度下也可以抑制钙调神经磷酸酶的活性。由于钙调神经磷酸酶是一个多功能的信号分子，因而细胞可能通过多层次的调节方式实现对多条信号传导通路的精细控制。 3．钙调神经磷酸酶与钙离子相互作用的电化学研究 用Triton X-100包埋钙调神经磷酸酶，将酶固定于热解石墨电极表面。用交流阻抗技术对Ca2+与钙调神经磷酸酶的相互作用进行了研究，结果表明，Ca2+与酶的相互作用可以分为两个阶段。在Ca2+浓度低于8×10-5M时，Ca2+对酶的空间结构的影响甚微，电化学反应电阻基本不变；高于此浓度时，持续的Ca2+浓度的升高导致膜上酶的空间结构发生较大的变化，电化学反应的电阻不断减小。作者同时考察了极化电压和pH对膜的Nyquist图谱的影响。