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目的:以盐酸川芎嗪为模型药物,泊洛沙姆407和泊洛沙姆188为温敏材料,筛选出眼用温度敏感型原位凝胶最佳处方,并建立完整的体内外评价体系;考察盐酸川芎嗪经眼部和其他途径给药后在大鼠体内的血药浓度变化和组织分布特征,以探讨药物经眼部给药实现全身转运的可行性,为眼部给药及其应用提供新的思路和方法。方法:建立盐酸川芎嗪原料药体外含量测定分析方法,并对其基本理化性质与稳定性进行考察;采用冷溶法制备盐酸川芎嗪眼用温敏原位凝胶,在单因素考察基础上,以胶凝温度为评价指标,通过星点设计-效应面法优化处方;建立盐酸川芎嗪眼用温敏凝胶的含量测定方法,并通过质量研究、稳定性试验、体外溶蚀与释放、眼部滞留时间及刺激性等方面进行体外评价;建立大鼠体内血浆及各组织器官中盐酸川芎嗪的含量分析方法;以大鼠为实验动物,随机分为三组,静脉注射与灌胃给药组(对照组)以及滴眼给药组(实验组),各组给予相同剂量(10mg/Kg)的盐酸川芎嗪,测定各取样时间点血浆与组织中药物含量,评价生物利用度及组织靶向性;盐酸川芎嗪滴眼液中分别加入三种吸收促进剂(1%冰片、1%壳聚糖和1%吐温80),与不加吸收促进的静脉注射和滴眼给药组血浆、脑组织药动数据进行比较,评价吸收促进剂对盐酸川芎嗪吸收入血与脑靶向性的影响;HPLC法测定盐酸川芎嗪眼用温敏原位凝胶滴眼给药后血浆和脑组织样品中盐酸川芎嗪浓度,评价盐酸川芎嗪温敏凝胶的血浆生物利用度和脑靶向性。结果:1.HPLC法测定了盐酸川芎嗪在不同介质中的平衡溶解度和油水分配系数,37℃下盐酸川芎嗪在水中的溶解度为294.56 mg/m L,油水分配系数log P为0.1;原料药在强光照射试验中含量下降,应避光贮藏。2.通过星点设计-效应面法选出温敏材料泊洛沙姆P407和泊洛沙姆P188的最优比例为19.98%:1.64%,选择0.01%苯扎氯铵作为抑菌剂,10%Na HCO3作为p H调节剂,确保眼用凝胶无菌及p H符合要求。3.制备得凝胶在室温(25℃)下为淡黄色透明液体,在眼部环境温度(约为34℃)为淡黄色半透明半固体;p H值在5.0左右,且胶凝温度、粘度及含量等指标均符合要求;稳定性试验表明本品在常温、避光条件下长期稳定;盐酸川芎嗪温敏凝胶体外溶蚀与释放试验显示,盐酸川芎嗪呈现良好的零级释放动力学过程(r=0.9979),同时凝胶的累积溶蚀率与盐酸川芎嗪累积释放率之间也呈现良好的线性关系(r=0.9997),药物的释放主要取决于凝胶的溶蚀;测得荧光标记的盐酸川芎嗪温敏凝胶在眼部滞留的时间为60 min,而盐酸川芎嗪滴眼液的眼部滞留时间为20 min,温敏凝胶在眼部停留的时间更长,且无论单次还是多次给药对兔眼均无明显刺激性。4.建立了大鼠血浆与各组织中盐酸川芎嗪的含量测定方法,均符合方法学要求;盐酸川芎嗪滴眼液的体内药动学研究结果显示,大鼠经静脉注射、灌胃和滴眼给予盐酸川芎嗪后,滴眼给药组相对于灌胃给药组,血浆药物生物利用度显著提高(P<0.05),滴眼给药组(63.22%)是灌胃给药组(16.88%)的3.75倍。以AUC0-t作为盐酸川芎嗪在组织中分布量的指标,静脉注射、灌胃、滴眼给药组AUC0-t大小顺序分别为肾>心>肝>脑>脾>肺,肾>肝>心>脾>脑>肺,肾>脑>心>肝>脾>肺。以静脉给药后各组织的AUC0-t为参比,计算盐酸川芎嗪经灌胃与滴眼给药后组织的相对靶向效率RTE(AUCig/io/AUCiv),同时以各自给药途径的AUC0-t总和为参比,计算各组织的靶向效率TE(AUC0-t/∑AUC0-t),结果显示,滴眼给药组的组织相对靶向效率均在60%~105%,其中脑组织的相对靶向效率最大,为104.78%,是灌胃给药相对脑靶向效率(29.62%)的3.54倍,且脑靶向效率仅低于肾靶向效率,为17.63%,是灌胃给药(10.95%)的1.61倍。说明盐酸川芎嗪通过滴眼给药具有一定的脑靶向性,有利于治疗脑部疾病。5.当盐酸川芎嗪滴眼液给药处方中分别加入三种吸收促进剂,结果在给药2 min后,三组血浆与脑组织中药物浓度均达峰值,快于滴眼对照组(5 min),说明1%冰片、1%壳聚糖和1%吐温80能加快盐酸川芎嗪吸收。其中1%壳聚糖组的血浆药物峰浓度Cmax(6.33μg/m L)明显高于滴眼对照组血浆药物Cmax(2.96μg/m L)(P<0.05),脑组织中药物Cmax(3.44μg/m L)略高于滴眼对照组脑组织(1.94μg/m L)(P>0.05),之后血浆和脑组织的药物浓度迅速下降,可能是通透性的开放导致盐酸川芎嗪能够快速被转运。三组血浆AUC0-t均高于滴眼对照组,且1%冰片与1%壳聚糖组脑组织中盐酸川芎嗪的AUC0-t高于滴眼对照组,1%吐温80组的AUC0-t与对照组相当,说明加入吸收促进剂在一定程度上能增加盐酸川芎嗪经眼部给药的入血与入脑量。但若以AUCbrain/AUCplasma评价盐酸川芎嗪经血入脑的靶向效率,1%冰片组(0.679)略高于滴眼对照组(0.662)(P>0.05),提示冰片对盐酸川芎嗪有一定的促进向脑组织转运的作用,但作用不显著。而1%壳聚糖和1%吐温80组AUCbrain/AUCplasma的比例均低于滴眼对照组,说明该浓度下的壳聚糖与吐温80并不能提高盐酸川芎嗪的脑靶向效率。6.盐酸川芎嗪温敏原位凝胶经滴眼给药后,血浆药物t1/2较滴眼液提高了1.67倍(P<0.05),AUC0-t提高了1.13倍(P>0.05);同样地,脑组织药物t1/2较滴眼液提高了1.48倍(P<0.05),AUC0-t提高了1.25倍(P<0.05)。且盐酸川芎嗪温敏原位凝胶滴眼给药组的AUCbrain/AUCplasma为0.725,是盐酸川芎嗪滴眼液给药组AUCbrain/AUCplasma(0.662)的1.11倍(P<0.05)。结论:盐酸川芎嗪滴眼液通过眼部给药后可以迅速吸收进入体循环并分布到各组织,其血浆生物利用度(63.22%)显著高于灌胃给药对照组(16.88%)(P<0.05),且对脑组织具有一定的靶向性,AUCbrain/AUCplasma为0.662,表明盐酸川芎嗪经眼局部给药产生全身治疗作用是有望实现的。同时,将盐酸川芎嗪制成温敏原位凝胶后,与滴眼液给药相比,血浆生物利用度(71.29%)(P<0.05)和AUCbrain/AUCplasma(0.725)(P<0.05)均有所提高,这可能与温敏原位凝胶增加了盐酸川芎嗪在眼部的滞留时间有关。