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电化学免疫传感器是以特异性的亲和反应为基础,通过检测平衡状态时抗原抗体复合物,实现待测物的分析测定。由于免疫化学反应发生在传感器表面,特异性好,灵敏度高,因此,电化学免疫传感器被广泛应用于医疗卫生、食品分析、环境检测等领域。
免疫传感器构建的关键技术之一就是如何将生物分子稳定、高活性地固定到换能器表面。纳米材料因其具有大的比表面积、高的表面活性、强吸附力及高催化效率等优异特性,可在增加生物分子的吸附量和稳定性的同时提高生物分子的催化活性,提高传感器的响应灵敏度。本学位论文主要是利用纳米材料的优点,提出采用纳米金吸附制备乙肝免疫传感器,通过静电吸附使乙肝抗体与电子导体硫堇同时固定在该膜上构成生物识别元件,利用辣根过氧化酶对硫堇的催化还原作用,从而达到对乙肝表面抗原(HBsAg)进行定量检测的目的。全文共3章,各章内容简介如下:
第1章:综述了生物传感器、免疫传感器的原理、分类以及生物活性分子固定化的各种方法,并介绍了乙型肝炎及其检测现状。
第2章:以金电极为基质电极,以铁氰化钾为氧化还原探针,采用循环伏安法研究和比较了戊二醛交联法和纳米金吸附法技术用于金电极表面固定抗体检测抗原的效果。实验结果表明,这两种固定方法制备的修饰电极均能达到固定抗体,定性检测抗原的效果。但戊二醛交联法对抗体的活性影响较大,而且灵敏度不及纳米金吸附法。第3章:在金电极表面自组装半胱胺分子,通过尾端的氨基吸附纳米金,最后静电吸附乙肝表面抗体和硫堇,以硫堇的还原峰电流的下降百分比(△I<,p>﹪)对乙肝表面抗原(HBsAg)进行定性和定量的检测。结果表明,在0.5~7.5μg/mL范围内,乙肝免疫传感器中硫堇的阴极峰电流(I<,pc<)下降的百分数与HBsAg浓度的对数呈良好的线性关系,线性回归方程为k=41.82+22.29×log[HBsAg],相关系数R为0.992。并对临床血清进行检测,将本研究方法与临床常用的ELISA法比较,研究结果表明,该传感器具有临床检验应用的可行性。