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目的:肝豆状核变性（Hepatolenticular Degeneration,HLD）是一种以铜代谢障碍为主的常染色体隐性遗传病,患者由于ATP7B基因突变导致胆道排铜困难,过量铜蓄积造成氧化应激产生大量自由基,诱发组织氧化损伤。肝脏是HLD的直接受累靶器官,过量铜诱发的肝脏病变是HLD患者的病理基础,以肝功能障碍、肝纤维化及肝硬化症状最为常见。作为少数可治疗的遗传性疾病之一,目前HLD药物治疗主要集中在排铜和抗氧化两方面,临床以铜络合剂为主,但需长期用药且易发生药物性肝损伤等毒副作用,严重影响患者的病情和预后。绿茶作为一种天然抗氧化剂,能够清除自由基抑制脂质过氧化,改善肝功能,其活性成分茶多酚（Green tea polyphenols,GTP）、茶氨酸（L-theanine,L-TA）对铜、铁等重金属具有较好的络合作用。为探究绿茶提取物（Green tea extract,GTE）对HLD的影响,本论文首先考察GTE对HLD模型TX小鼠铜代谢、排泄及肝保护作用的影响,进一步通过离子计筛选GTE中铜络合活性成分,最后并对其活性进行药效验证,为绿茶辅助改善HLD临床症状提供了理论依据。方法:优化超高效液相色谱（Ultra Performance Liquid Chromatography,UPLC）色谱条件,测定GTE中L-TA及没食子酸（Gallic acid,GA）、儿茶素（Catechin,C）、表儿茶素（Epicatechin,EC）、没食子儿茶素（Gallocatechin,GC）、表没食子儿茶素（Epigallocatechin,EGC）、表儿茶素没食子酸酯（Epicatechin gallate,ECG）、表没食儿子茶素没食子酸酯（Epigallocatechin gallate,EGCG）8种代表性成分的含量,建立GTE质量控制方法;以TX小鼠为研究对象,HE染色法（Hematoxylin-eosin）观察GTE和PCA（Penicillamine,PCA）治疗前后各组小鼠肝组织病理学变化,测定各组小鼠血清碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase,AKP）、谷丙转氨酶（Alanine aminotransferase,ALT）、谷草转氨酶（Aspartate aminotransferase,AST）活性及肝脏丙二醛（Malondialdehyde,MDA）、总谷胱甘肽（Total glutathione,T-GSH）水平和超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase,SOD）活性,考察GTE及PCA对TX小鼠肝功能和氧化应激水平的影响,探究GTE辅助改善HLD临床症状的作用效果;采用原子吸收法（Atomic Absorption Spectroscopy,AAS）测定小鼠肝、脑、肾、尿液及粪便中铜含量,考察GTE对TX小鼠铜代谢、排泄的影响。离子计法构建Cu2+络合能力的筛选方法,优化络合反应条件(p H值、离子强度、Cu2+浓度、化合物浓度),评价GTE、GTP、L-TA、7个多酚单体和2个化药单体对Cu2+的络合能力,筛选GTE中的铜络合活性成分;结合GTP和L-TA对TX小鼠肝、脑、肾、尿液、粪便中铜含量以及肝组织和血清中ALT、AST、AKP、MDA、T-GSH、SOD等生化指标的影响,明确GTE及铜络合活性组分GTP、L-TA辅助干预HLD的作用。结果:优化UPLC色谱条件为:ZORBAX RRPH Eclipse Plus C18 column（1.8μm,2.1ⅹ100 mm）色谱柱;0.1%甲酸水（A）-乙腈（B）梯度洗脱;流速:0.25 m L/min;进样量:2μL;检测波长:278 nm或199 nm;柱温:30℃。建立GTE中8种代表性成分的定量分析方法,该方法线性良好,有较好的稳定性、精密度和准确度,可以用于GTE的质量控制。GTE可显著改善TX小鼠肝细胞形态和组织结构;与模型组相比,不同剂量的GTE及PCA干预后,TX小鼠血清ALT、AST、AKP活性和肝脏MDA水平显著降低（P＜0.05,P＜0.01）,SOD活力及GSH含量明显增加（P＜0.05,P＜0.01）;AAS结果显示,模型组小鼠肝、脑、肾组织中铜含量显著高于正常组,尿液、粪便排铜减少,GTE可促进小鼠铜的代谢、排泄,降低了组织铜含量（P＜0.05,P＜0.01）。GTE可通过促进组织排铜、抑制氧化应激改善TX小鼠肝功能,减轻肝脏损伤。优化得到离子计法测定Cu2+的最佳检测条件,方法学研究表明该方法具有较好的精密度、稳定性和重复性,可用于测定化合物与Cu2+的络合能力。铜离子筛选结果表明GTE、GTP、L-TA及各单体对Cu2+具有较强的络合能力（83.75%-95.44%）。此外,与正常组相比,GTP和L-TA可降低TX小鼠血清ALT、AST、AKP活性和肝脏MDA水平,提高SOD和GSH活性（P＜0.01）,具有肝保护作用;AAS结果表明GTP和L-TA在体内能络合游离铜,促进TX小鼠肝、脑、肾组织通过尿液、粪便排铜,减少铜蓄积。结论:GTE通过络合铜离子,促进TX小鼠尿液和粪便排铜,减少小鼠肝、脑、肾组织铜的蓄积,同时调节氧化还原平衡抑制机体氧化应激,改善过量铜诱导的肝细胞氧化损伤。GTP和L-TA具有较强的抗氧化活性,能够有效络合Cu2+,可能是GTE辅助改善HLD症状的主要活性成分。