天麻素注射液对OGD诱导损伤的HBMEC保护作用及机制研究

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[目的]研究天麻素注射液对缺氧缺糖诱导损伤的人脑微血管内皮细胞的保护作用及机制。[方法]1.体外培养HBMECs,建立稳定的细胞实验平台。2.HBMECs被随机分为4组:正常组、模型组、尼莫地平注射液组和天麻素注射液组。除正常组外,其他各组均采用OGD法造模,药物组在造模前和造模过程中分别加入不同浓度的尼莫地平注射液(11.950,2.390和0.478 μM)和天麻素注射液(3.386,0.677 和 0.135 mM),OGD 损伤作用 1、3、6、9 h 后,MTS 法检测各组细胞活力。3.qPCR和Western blot分别检测天麻素注射液对OGD诱导损伤的HBMEC内Claudin-5、Occludin和ZO-1 mRNA转录和蛋白表达水平的影响[结果]1.HBMEC密度达90%后,OGD诱导损伤9h,细胞活力降为57%。2.HBMEC密度达90%后,OGD诱导细胞损伤1h,模型组与正常组,尼莫地平注射液中、低浓度组和天麻素注射液三个浓度组与模型组细胞活力均无统计学差异(P>0.05);OGD诱导细胞损伤3和6h,模型组细胞活力显著低于正常组,尼莫地平注射液低浓度组和天麻素注射液三个浓度组与模型组比,均起到细胞保护作用(P<0.05);OGD诱导细胞损伤9 h,尼莫地平注射液低浓度组和天麻素注射液中、低浓度组细胞活力与模型组无统计学差异(P>0.05),其他药物组低于模型组(P<0.05)。3.HBMEC密度达90%后,OGD诱导细胞损伤3 h,尼莫地平注射液组和天麻素注射液组与模型组相比,具有上调Claudin-5和OccludinmRNA转录和蛋白表达水平的作用(P<0.05),但对ZO-1无影响(P>0.05)。[结论]1.OGD诱导HBMEC损伤早期,天麻素注射液对HBMEC具有明显的保护作用,但随着OGD损伤时间的延长,天麻素注射液的保护作用消失,高浓度药物反而会加重细胞损伤。2.OGD诱导HBMEC损伤早期,天麻素注射液对HBMEC和BBB的保护作用与其上调TJs相关蛋白Claudin-5和OccludinmRNA转录和蛋白表达水平密切相关。
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