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小球藻含有多种生物活性物质,在农业、工业、食品和饲料等各个领域都有很高的经济价值。小球藻多糖具有免疫活性、抗氧化和降低胆固醇等多种功能,因而被广泛用于人类营养和的补充剂。本研究对小球藻培养条件进行优化,进一步提高其多糖产率,并对小球藻各分级多糖与活性之间的关系进行研究,为小球藻多糖的开发利用奠定基础。对小球藻的培养条件进行优化以提高其产胞外多糖的产量。结果显示小球藻产胞外多糖的最适条件为:NaNO?浓度0.9g/L,MgSO4·7H2O浓度0.3g/L,NaHCO3浓度0.05g/L,最适光照条件为12h。此条件下的胞外多糖产率达到78.98%,与F/2基础培养基比较多糖产率提高了10%。对小球藻粗多糖进行理化分析,经红外光谱检测表明其多糖是一种硫酸性多糖,糖醛酸含量为1.60%。利用超滤离心,得到小球藻多糖四个不同的分子量级,小于10KD、10KD-30KD、30KD-100KD、大于100KD,分别记为CEP1、CEP2、CEP3和CEP4。对小球藻粗多糖及四种分级多糖进行了抗氧化活性研究。粗多糖CEP抗氧化性较差,CEP1、CEP2、CEP3和CEP4的DPPH·的清除能力、T-AOC、·OH的清除能力都比粗多糖CEP高;CEP2对DPPH·有较好的清除作用,清除率为44.52%;CEP3对·OH清除率达到56.61%,且T-A OC能力为51.02%。小球藻粗多糖及四种分级多糖对大肠埃希氏菌、枯草芽孢杆菌和蜡状芽孢杆菌均有一定的抑制效果,高分子量级的CEP4对枯草芽孢杆菌的抑菌效果最好,抑菌圈直径为4.67mm;CEP3高剂量组能较好地抑制蜡状芽孢杆菌的生长,抑菌圈直径达到4.65mm,CEP2高剂量组次之。通过测定免疫抑制小鼠脾脏和胸腺指数发现,环磷酰胺模型组的脾脏指数和胸腺指数明显低于正常组和对照组;与环磷酰胺对照组比较,实验组均可以提高免疫缺陷小鼠的胸腺指(P<0.05),相比较于粗多糖的CEP实验组,CEP1、CEP2、CEP3、CEP4实验组在同浓度中都显示出较好的免疫效果,说明分级多糖的免疫活性比粗多糖的免疫效果更佳,其中CEP4高剂量组的免疫水平最高,胸腺指数达到0.029,免疫效果随着多糖分子量增大而递增,免疫水平随着其浓度增加而有提高趋势。对小鼠血清中的IL-4和IFN-γ含量检测发现CEP4高剂量组能明显提高IL-4和IFN-γ含量,含量分别达到36.04pg/mL和340.56pg/mL,说明CEP4具有较好的免疫活性。胸腺和脾脏淋巴细胞含量测定结果表明,环磷酰胺模型组的胸腺、脾脏淋巴细胞含量低于正常组,咪唑阳性组的胸腺、脾淋巴细胞含量比模型组高和正常组都高(P<0.05),各实验组的胸腺、脾淋巴含量高于模型组,说明各分子量级的多糖在一定程度上可以提高小鼠胸腺淋巴细胞含量,其中CEP4实验组的胸腺、脾淋巴细胞含量(1.13×106和9.15×105)比模型对照组的胸腺和脾脏淋巴细胞含量(3.05×104和6.41×105)高,说明CEP4对胸腺、脾淋巴细胞含量的提高效果最好,免疫活性最佳。