论文部分内容阅读
天然产物研究为药物研发提供结构新、疗效好、毒性低的活性物质,成为新药研究的先导和源泉。本文分为两部分:第一部分为杨梅（Myrica rubra）核化学成分分离、纯化、结构确证与活性研究。1.利用KB纸片扩散法进行抗菌活性筛选,对杨梅核中的化合物进行了跟踪分离,并对分离到的化合物进行了抗菌活性研究。2.用GC-MS对杨梅核脂肪酸与蜡质成分进行了分析,结果表明:杨梅中脂肪酸和蜡质的总含量为31.10%,其中含有8种脂肪酸和3种长链烷烃,主要为棕榈酸（C16:0）28.22%、亚油酸（C18:2）14.4%、顺式-油酸（C18:1）25.74%、芥酸（C22:1）15.68%,十七烷5.2%、十八烷5.87%、十九烷4.71%,不饱和脂肪酸总含量为55.91%,其中油酸、亚油酸含量为40.19%。为提高其有效利用率提供了参考。3.杨梅核系浙江海通食品集团股份有限公司提供,将杨梅核阴干粉碎,99%乙醇提取得浸膏,按极性粗分后进行抗菌活性筛选,跟踪分离其中化合物。各部分采用常规的硅胶柱层析、制备薄层层析、反相柱层析、凝胶Sephadex LH-20柱层析及重结晶等手段分离到22个化合物,利用现代波谱技术(IR、UV、EI-MS、HR-ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR、DEPT、1H-1H COSY、HMQC、HMBC、NOEDS和NOESY等),确定了黄酮如YM-6、三萜如YM-16、甾体如YM-1等,共16个化合物的结构。4.对杨梅核中分离得到的化合物进行了抗菌活性研究,YM-16对嗜麦芽窄食单胞菌（Stenotrophomonas maltophilia）与大肠杆菌（Escherichia coli）具有抗菌活性。YM-16浓度为15mg/mL时与古伦霉素浓度为30 mg/mL时,对嗜麦芽窄食单胞菌抗菌活性相当,抑菌圈直径分别为7.1mm与7.3mm。5.首次将表没食子儿茶素表没食子酸（EGCG）水解为表没食子儿茶素（EGC）,进行了反应条件的优化。第二部分内容为海洋真菌Fusarium sp.次级代谢产物的化学成分分离、纯化、结构确证与活性研究。1.对镰刀菌属互花米草内生真菌Fusarium sp.的次级代谢物进行了研究,并对其中分离到的化合物进行了初步的抗结核活性与肝毒性筛选。2.镰刀菌属内生真菌Fusarium sp.系从长江口海草互花米草（Spartina alterniflora）中分离得到,对真菌进行了发酵培养,对真菌培养物的菌丝体和发酵液分别用99%乙醇进行提取。将提取液减压蒸干后经HPLC检测,两部分基本相同,合并进行化合物分离。各部分采用常规的硅胶柱层析、制备薄层层析、凝胶Sephadex LH-20柱层析、反相柱层析及重结晶等手段分离到12个化合物,利用各种现代波谱技术,确定了生物碱如F4-3、甾体如F4-1等8个化合物的结构。3.使用二倍试管稀释法测定了化合物的抗结核分歧杆菌（Mycorbacterium tuberculosis H37RV）活性,使用MTT法研究了其对正常肝细胞的毒性,发现F4-3对结核杆菌具有活性,MIC100为5μg/mL,且对正常肝细胞毒性很小。